树突状细胞在循环发现抗原呈递细胞

　　树突状细胞是在循环中发现的抗原呈递细胞。它们是具有主要组织相容性复合物II表面复合物的特殊免疫细胞类型，可进行外源抗原加工。尽管树突细胞疫苗疗法已被商业化用于晚期胰腺癌，但需要对肿瘤相关抗原有深入的了解才能改善患者的预后。已经提出了利用树突细胞的抗原加工能力的替代方法，以提供针对不同癌症以及跨越那些癌症的不同临床表现的通用免疫疗法。
　　 出国看病服务机构专家进行的一项研究表明，与羟化和纯净的普朗尼克纳米颗粒相比，具有乙基侧基和普朗尼克纳米颗粒的羧基化表面的聚恶唑啉聚合物导致最大的白介素-2分泌。据推测，羧基化金纳米颗粒可靶向淋巴结的未成熟和成熟的树突状细胞，并通过主要组织相容性复合物I途径促进交叉呈递。由聚乳酸共嵌段聚合物合成纳米颗粒，并通过透析方法将卵白蛋白抗原与TLR7激动剂CL264偶联。抗原与胶束结合72小时。共胶化显示卵白蛋白和CL264被骨髓树突细胞吸收，如罗丹明和FITC标记的卵白蛋白和荧光显微镜所显示的。
　　 羧基化金纳米颗粒在体外显示树突状细胞的标志物CD11c+对FITC-卵清蛋白细胞的吸收增加。体内小鼠结果显示肿瘤重量和IgG效价显着降低。在羧基化纳米颗粒-卵清蛋白的肿瘤中观察到更频繁的T细胞攻击，主要组织相容性复合物I交叉呈递增加，从而引起更强的免疫反应。小鼠体重被用作副作用的评估，尽管进一步的验证研究应利用全身免疫反应的其他标记，包括认知测试。目前在临床试验中很少评估使用脂质体的癌症治疗方法，因此应预料到重大的临床试验挑战。
　　 针对引流淋巴结的未成熟和成熟树突状细胞的另一种方法试图激活细胞毒性T细胞和肿瘤微环境。用蜂毒肽构建了杂合肽水凝胶，该蜂肽适于形成蜂毒肽32，以使其自然溶血特性最小化。透射电子显微镜显示交织的纳米纤维，并且频率扫描流变学分析表明在装载化学治疗剂阿霉素后具有高储能模量。
　　 体外测试评估了B16F10小鼠黑素瘤细胞，树突细胞和L929鼠成纤维细胞中的肿瘤细胞凋亡。蜂肽-阿霉素水凝胶显示出显着的细胞抑制率和高细胞死亡率。流式细胞仪显示小鼠组织样品的坏死组织百分比显着增加。暴露于水凝胶会导致CD80和CD86的表达增加，从而模仿白介素-2，白介素-6，II-12和肿瘤坏死因子α的增加。
　　 实验组体内结果表示注射后第3天和第5天阿霉素持续释放。水凝胶显示出改善的抗肿瘤活性，并显着延长了注射后长达50天的存活时间，而对照组中则为40天或更少。小鼠在整个8天治疗中的血液相容性评估显示正常行为和体重表型。此外，非靶向免疫细胞，红细胞以及肾脏和心脏功能正常。
　　 肿瘤注射后长达60天，MRD水凝胶治疗也未显示转移迹象。观察到消炎性样肿瘤相关巨噬细胞数量显着减少，CD4+和CD8+T细胞数量增加以及干扰素-γ和白介素-2的抗肿瘤细胞因子浓度增加。因此，MRD-阿霉素水凝胶在体外和体内动物研究中均产生了有效的抗肿瘤作用。这种水凝胶具有通过靶向树突状细胞和T细胞来诱导癌细胞凋亡同时维持健康组织的潜力，从而产生抗肿瘤作用。
　　 树突细胞具有可被靶向的不同功能子集，因此癌症抗原可以呈递给CD4+和CD8+T细胞。Sehgal及其同事进行的一项研究表明，带有抗生物素蛋白的聚乳酸-乙醇酸纳米颗粒的开发可以使抗体附着于多个树突细胞亚组。如前所述，使用具有两亲性配体和脂肪酸缀合物的方法合成聚乳酸-乙醇酸纳米颗粒。
　　 B树突细胞A3+髓样树突细胞的目标是实现抗原的交叉呈递并引发更强的T细胞活化。与其他免疫细胞类型相比，负载的聚乳酸-乙醇酸金纳米颗粒在抗原呈递细胞中的摄取增加了。另外，通过干扰素-γ测量了增加的T细胞活化。评估了金纳米颗粒呈递放置在聚乳酸-乙醇酸核心内的肿瘤相关抗原的能力。将SOX2肺癌基因置于聚乳酸-乙醇酸核心中，并能够引发SOX2相关的CD4+和CD8+激活。这项研究首先证明了以人B树突细胞A3+和树突细胞-SIGN靶向的金纳米颗粒导致抗原特异性T细胞活化的增加。
　　 用载有B树突细胞A3+和树突细胞SIGN抗体的金纳米颗粒刺激从癌症患者中提取的骨髓细胞，并产生最大的SOX2特异性T细胞刺激作用。在分析了这些激活中的细胞因子分泌后，发现白介素-15导致人肺癌骨髓样品中多个树突细胞亚群靶向和癌症抗原呈递。
　　 天然杀伤细胞是来自淋巴样祖细胞谱系的免疫细胞，可监视循环中的细胞并通过释放穿孔素和颗粒酶来诱导细胞裂解。在癌症中靶向天然杀伤细胞的多重好处包括它们影响干扰素-γ并诱导死亡受体介导的细胞凋亡的能力。另一个好处还在于对自然杀伤-92细胞系的广泛了解，可将其用于初步研究，包括体外测定和临床前测试。
　　 专家等人的研究。举例说明了在融合脂质体设计中使用来自自然杀伤-92细胞系的活化的自然杀伤细胞膜的方法。这项研究评估了阿霉素加载到脂质体的水性核心中后对小鼠MCF-7实体瘤的功效。通过体外血流测定，自然杀伤细胞显示出癌细胞比健康组织吸收更多的癌细胞。另外，鼠体内结果显示抗MCF7活性以及血浆循环中的生存能力延长。这些结果表明，用于融合脂质体形成的方法可以转化为其他癌细胞系，并随后转化为其他体内模型。
　　 考虑到融合脂质体的生物衍生性，它们是首选的纳米颗粒设计，因为它们具有更高的血液相容性，并能逃避吞噬细胞靶标。自然杀伤细胞是使用特定的自然杀伤细胞受体开发的，包括细胞表面的CD56，自然杀伤G2-D和自然杀伤p30。自然杀伤细胞的制备遵循已知的脂质体制造膜挤出技术。该技术在氯仿中使用DOTAP：DOPE，然后进行薄膜水化，用聚碳酸酯滤膜挤压，再在分离的自然杀伤细胞膜中进一步挤压。
　　 乳腺癌体外小鼠模型用于脂质体表征，载药量和靶向MCF-7肿瘤的功效均获得大多数结果。获得了小鼠MCF-7肿瘤诱导后的初步体内结果，以支持有希望的体外结果。分析结果显示，与脂多糖阳性对照和游离阿霉素相比，促炎细胞因子白介素-1β，白介素-6和肿瘤坏死因子α降至最低。每周静脉注射21天后，小鼠静脉注射显示纳米颗粒消除48h，肿瘤体积和重量减轻。通过融合脂质体实现了增强的抗肿瘤活性，如升高的肿瘤抑制率所示。阿霉素-金纳米颗粒达到了78％的肿瘤抑制率，而对照组中只有24％的抑制率和仅阿霉素组中有64％的抑制率。