从理论上讲，人和小鼠的外周血T细胞受体能够识别出惊人数量的自身和非自身抗原，这对于对病原体和潜在的恶性细胞进行广泛的免疫监视至关重要。一个可能的T细胞受体特异性之间的巨大差异是在胸腺T细胞发育过程中实现的，在胸腺中，T细胞经历了编码每个α和βT细胞受体链可变区的基因片段的体细胞重组。基因片段之间的连接处核苷酸的随机添加和缺失进一步扩大了独特T细胞特异性的可能数量，导致形成了高变体互补决定区域3，该区域决定了针对特定抗原的T细胞受体特异性分子。这种多样性显然有助于识别多种病原体。
免疫检查点封锁依赖于在T细胞上输注靶向抑制性受体的抗体，从而破坏抑制性信号传导途径并增强内源性免疫应答。检查点封锁在癌症治疗中的未来的作用非常大，但在治疗期间引起的确切免疫机制尚未完全定义。免疫检查点封锁作为癌症免疫疗法的成功主要取决于肿瘤内的T细胞的活性，因为这些肿瘤浸润淋巴细胞与患者的治疗效果互相关联频率和功能。在动物模型和人类患者中，用免疫检查点封锁治疗可提高肿瘤浸润淋巴细胞频率并增强T细胞效应子功能。但是，除了免疫活性的这些指标，T细胞特异性的肿瘤内的相对多样性现在被评价为在免疫疗法的结果。这个概念仍然是有争议的，尚未确定肿瘤浸润淋巴细胞群体中更大的T细胞受体多样性还是更大的细胞克隆性与更好的临床反应相关。两种情况似乎都是合理的。例如，高度集中的克隆T细胞应答可与显着的肿瘤相关抗原强烈反应，可提供强大的抗肿瘤免疫力。另一方面，更广泛的T细胞特异性可以使免疫系统对大量肿瘤细胞表达的多种新抗原产生反应。
DNA测序技术的最新进展已允许通过对异源细胞群内存在的所有T细胞受体β高变体互补决定区域3区进行测序来测量多克隆T细胞的多样性。但是，关于癌症治疗如何影响肿瘤浸润淋巴细胞多样性以及这是否与结果相关的报道相互矛盾。在三阴性乳腺癌小鼠模型中，经抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4治疗后，肿瘤浸润淋巴细胞之间的T细胞受体多样性增加，但抗程序性死亡受体1的添加却未改变。一项小鼠黑色素瘤研究表明，放射疗法扩大了肿瘤浸润淋巴细胞的范围，但多样性不受抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4检查点封锁的影响。另一项临床前研究彻底探索了肿瘤浸润淋巴细胞多样性如何受到多种免疫调节疗法治疗B16黑色素瘤的影响。在这里，总的T细胞多样性在免疫治疗期间几乎没有受到影响。取而代之的是，通过在减缓肿瘤生长方面更成功的治疗，可以丰富肿瘤反应性克隆。同样，在人类乳腺癌患者中，单独使用抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4治疗可提高肿瘤浸润淋巴细胞密度，但不影响T细胞受体多样性。显然，该领域对此问题缺乏真正的共识。这些先前研究的局限性在于，T细胞受体分析相对集中于总T细胞或甚至未分级的整个肿瘤组织的方法，而没有考虑不同T细胞亚群之间多样性的可能变化。一些T细胞亚群有助于控制肿瘤的进展，包括CD8+细胞毒性T淋巴细胞和产生CD4+Thelper-1细胞的干扰素γ。相比之下，Foxp3+T调节细胞抑制CD4+和CD8+T细胞的效应子活性，从而阻碍肿瘤免疫。尚未报道在癌症免疫治疗中如何影响这些个体肿瘤浸润淋巴细胞亚型的克隆性或多样性。在这里，出国看病服务机构采用了不同的方法，着重于单个肿瘤浸润淋巴细胞子集。出国看病服务机构的结果表明，免疫检查点封锁治疗可增加黑色素瘤肿瘤中效应CD4+和CD8+T细胞的频率和功能，但不会显着改变肿瘤浸润淋巴细胞谱库中的T细胞受体多样性。
免疫检查点封锁的效用是公认作为用于人类黑素瘤患者的处理原则。尽管仍仅在部分患者中可见长期缓解，但联合免疫疗法可进一步改善这些临床结局。同样，在动物模型中，已在接受联合免疫治疗方案治疗的荷黑素瘤小鼠中证明了对联合检查点阻断的抗性。为了克服这种抗药性，出国看病服务机构已采用抗程序性死亡受体1或细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4加上抗淋巴细胞活化基因蛋白3的积极组合方法，因为抗淋巴细胞活化基因蛋白3目前正在临床试验中作为单一疗法并与抗-程序性死亡受体1。出国看病服务机构以前表明本三联组合相比单一疗法或用于恢复CD8甚至双抗体组合优于加肿瘤浸润淋巴细胞功能和提高小鼠的存活率与播散性白血病。为了确定这种免疫疗法是否还能改善对黑色素瘤的反应，出国看病服务机构在患有已确立的皮下黑色素瘤的B6小鼠中测试了不同的组合，再次显示出改善的结果，例如较小的肿瘤，生长速度较慢和抗程序性死亡受体1治疗的小鼠更持久的反应或细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4或淋巴细胞活化基因蛋白3与其他方式的比较。基于这项工作，出国看病服务机构在这里使用该三联组合免疫检查点封锁进行了所有后续实验，以治疗带有B16黑色素瘤肿瘤的B6小鼠。此黑素瘤细胞系具有编码众多新表位相似的人黑素瘤广泛的突变景观，允许的对抗善意肿瘤抗原多样的T细胞免疫应答有意义的评估。
在肿瘤发生后的第4、8、12和16天，用免疫检查点封锁或媒介物对照治疗已建立黑色素瘤肿瘤的受试者。在出国看病服务机构的实验室和其他人以前的工作表明，同型对照抗体不提倡[抗肿瘤免疫应答是不包括在这里，因此。相反，抗程序性死亡受体1或细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4或淋巴细胞活化基因蛋白3组合的免疫疗法可有效延缓黑色素瘤肿瘤的进展。例如，到第21天时，两组中的大多数小鼠还活着，接受免疫检查点封锁的小鼠的平均肿瘤体积明显变小。在经过免疫检查点封锁治疗的小鼠子集中，即使超过研究的第24天，肿瘤仍然异常小。因为出国看病服务机构没有将死亡作为这些研究的终点，所以出国看病服务机构使用500mm的任意肿瘤体积作为替代阈值，以比较治疗的持久性而不是实际存活率。而用磷酸盐缓冲液处理的所有小鼠第21天越过该阈值，这些接收免疫检查点封锁证明抵制肿瘤进展与几个存活长达30天。这些数据突出了免疫检查点封锁治疗B16黑色素瘤的总体功效，但也显示了反应范围，概括了在接受联合检查点阻断治疗的黑色素瘤患者中观察到的各种临床结果。
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