CD47的第四和第五个跨膜结构域之间的环中Cys33与细胞外免疫球蛋白域中的Cys263之间的二硫键的破坏损害了CD47信号调节蛋白α的结合。在2019年,使用CC2C6抗体的单倍体遗传筛选鉴定出谷氨酰胺肽环转移酶样蛋白是CD47-CD47信号调节蛋白α相互作用的关键调节子。在这项研究中,发现CD47的N末端焦谷氨酸残基是谷氨酰胺肽环转移酶样蛋白催化的翻译后修饰,对于CD47的细胞表面表达是不可缺少的,但是CD47信号调节蛋白α结合的必要成分。删除CD47,抑制谷氨酰胺肽环转移酶样蛋白活性和阻断CD47的IgV样结构域在消除CD47–CD47信号调节蛋白α结合和诱导靶细胞吞噬作用方面具有可比的作用,表明IgV样结构域和N末端焦谷氨酸的完整性对于维持CD47信号调节蛋白α结合。
出国看病服务机构发现,当源自红血细胞被发现CD47的吞噬和免疫识别的作用,CD47当输到野生型受体小鼠,在巨噬细胞用氯膦酸盐脂质体被耗尽其逆转小鼠迅速清除。发现脾脏中的红髓巨噬细胞是通过吞噬作用消除大部分红细胞的原因。重要的是,巨噬细胞与野生型红细胞而不是Cd47和红细胞接触,触发CD47信号调节蛋白α磷酸化,并且CD47信号调节蛋白α的阻断导致野生型红细胞的吞噬作用,这首次表明CD47信号调节蛋白α轴具有关键作用自保护红细胞不受循环中的任意破坏。CD47在防止免疫识别和对自身组织的攻击中的作用似乎是跨物种保守的功能。实际上,粘液瘤病毒基因m128L,其编码的膜蛋白具有高氨基酸序列同源性牛CD47,是可有可无的粘液瘤病毒复制,但必需通过吞噬细胞活动的抑制在宿主中诱导致死性感染。
除了调节正常组织的动态平衡外,CD47在逃避免疫清除的癌细胞中也至关重要。CD47的表达升高已经在广泛范围的人类癌症,包括造血恶性和非造血肿瘤中观察到。CD47似乎并不直接参与调节癌细胞的增殖和生存力,如CD47缺陷型癌细胞来自它们的亲本CD47表达细胞在细胞培养物表型无法区分。使用单克隆抗体CD47的阻断由专业吞噬细胞和抑制肿瘤植入和生长在缺少T细胞,B细胞和天然杀伤细胞的小鼠增加的肿瘤细胞的吞噬功能。然而,巨噬细胞的耗尽在CD47阻断后恢复了肿瘤的生长,这表明癌细胞中CD47的表达对于逃避巨噬细胞介导的吞噬攻击至关重要,并且吞噬细胞在针对癌细胞的免疫监视中具有重要作用。
在转录水平上,上游和下游超级增强子调节CD47的表达。刺激肿瘤坏死因子炎症途径激活核因子,后者直接与CD47的组成增强子结合,调节其在乳腺癌细胞中的表达。缺氧诱导因子也与乳腺癌细胞中的CD47启动子结合,对一组1,040个原发性人类乳腺癌样本的分析显示,缺氧诱导因子与CD47表达之间存在很强的相关性。在黑色素瘤细胞中,ERK信号上调CD47通过转录因子核呼吸因子的活性进行转录。在人和小鼠的白血病和淋巴瘤细胞中,MYC癌蛋白显示直接与CD47启动子结合以调节CD47表达。在这项研究中,MYC失活抑制了CD47表达,这与CD4募集的增加有关T细胞和巨噬细胞进入小鼠肿瘤并具有改善的存活率。通过强制表达恢复CD47表达后,这些作用被逆转。综上所述,这些结果表明,CD47信号调节蛋白α信号的致癌激活使癌细胞能够通过抑制专业吞噬细胞的吞噬作用来逃避免疫检测和清除作用。
程序性死亡受体于1992年首次鉴定,是属于B7-CD28超家族的55kDa跨膜蛋白。它具有一个细胞外N端IgV样结构域和一个包含两个酪氨酸碱基的胞质尾巴。程序性死亡受体的表达在各种活化的免疫细胞中被诱导,是T细胞衰竭的标志之一。目前,程序性死亡受体具有两个已知的配体,程序性死亡配体和程序性死亡配体2,两者均属于B7家族。
一个2017研究报道了程序性死亡受体-程序性死亡配体轴调节的吞噬能力的新的作用的肿瘤相关巨噬细胞。在这项研究中,来自早期人类和小鼠肿瘤的早期血清标志物与正常组织的单核细胞或巨噬细胞相似,仅表达最低水平的程序性死亡受体,但随着早期血清标志物中程序性死亡受体的表达呈指数增加,肿瘤生长。从表型上看,大多数程序性死亡受体早期血清标志物是M2样巨噬细胞,它们构成了晚期小鼠和人类结肠癌的主要巨噬细胞种群。使用抗程序性死亡受体抗体或程序性死亡配体阻断剂破坏程序性死亡受体–程序性死亡配体轴可导致缺乏T细胞,B细胞和天然杀伤细胞但具有抗肿瘤作用的小鼠产生抗肿瘤反应仍然保留功能性巨噬细胞,表明在早期血清标志物中程序性死亡受体–程序性死亡配体轴的抑制是抗肿瘤功效的原因。没有注意到程序性死亡受体早期血清标志物对程序性死亡配体过表达和程序性死亡配体基因敲除肿瘤细胞的吞噬能力没有差异。相比之下,程序性死亡受体的敲除显着增加了程序性死亡受体对肿瘤细胞的吞噬作用。因此,这些观察结果强烈支持程序性死亡配体在癌细胞上的表达使其能够逃避巨噬细胞介导的吞噬作用的观点,并且程序性死亡受体–程序性死亡配体轴的阻滞可能诱导吞噬细胞介导的和T细胞介导的抗肿瘤免疫。 |