过继细胞转移的细胞免疫疗法

　　在过去的几十年中，过继细胞转移的主要进步是基因编辑技术的发展，这使得有可能为缺乏免疫原性的肿瘤生成肿瘤相关抗原特异性效应细胞，或者对过继转移的细胞进行重新编程以改善其持久性或抗凋亡潜力。出国看病服务机构列出了正在大肠癌中测试的各种肿瘤相关抗原。修饰效应细胞基因组的方法可分为两类：基因插入和基因敲除。由于基因敲除技术已在几种实验疗法中使用，因此在此出国看病服务机构主要关注已用于大肠癌治疗的基因插入技术。基因插入是一种将人工或选定基因插入免疫细胞基因组以增强特异性，持久性和抗肿瘤活性的策略。可以主要通过逆转录病毒和慢病毒系统等病毒载体，或者转座子和电穿孔技术来实现这一目标。T细胞受体是已在众多实验和临床试验中测试过的星形基因。其他具有改善效应细胞抗肿瘤作用的基因。
　　 其中一个问题是肠道内菌群的存在，这些菌群经常污染大肠癌标本，从而难以从大肠癌肿瘤中生长肿瘤浸润淋巴细胞。为了绕过该限制，使用引流肿瘤的淋巴结获取肿瘤特异性T细胞。淋巴结是抗原呈递细胞处理肿瘤相关抗原的主要位点，并通过II类或I类人免疫复合物分子将决定性表位呈递给T细胞受体。引流肿瘤的淋巴结接受肿瘤病变处的淋巴引流，因此肾细胞癌接触肿瘤相关抗原的所有组成部分并自然引发。据推测，引流肿瘤的肾细胞癌可能比一般淋巴结内的淋巴细胞具有更高的肿瘤特异性。一经刺激。在1990年代后期，奥特和特瑞自报告了他们对转移性大肠癌患者的个别研究。他们治疗的患者的肾细胞癌，将其扩大体外和观察到的肯定响应和显著延长生存，提示与肾细胞癌过继细胞转移可以安全地用于治疗恶性大肠癌。在最近的一项研究中，对肾细胞癌治疗了16名中晚期大肠癌患者。结果表明，所有IV期疾病患者均具有客观反应，过继细胞转移组的生存期从0.8年显着延长至2.6年，进一步证明了肾细胞癌在大肠癌患者中临床应用的效率和可行性。
　　 基于这些有希望的结果，金等在71位大肠癌患者中进行了大型I、II期临床研究。该试验表明，肾细胞癌比肿瘤浸润淋巴细胞包含更多的活化淋巴细胞。肾细胞癌扩增细胞的主要亚型是肿瘤特异性效应子和中央记忆T细胞。与对照组相比，肾细胞癌组患者的总体生存率显着改善，并且未观察到副作用。由于肾细胞癌在大肠癌中显示出过继细胞转移在大肠癌中具有相似甚至更好的作用而没有污染问题，因此它们可能是大肠癌过继治疗的肿瘤浸润淋巴细胞样细胞的主要来源。由于这些细胞类型是天然存在的，并且没有免疫原性并且几乎没有副作用，因此有必要进行进一步的研究来解决使用肿瘤浸润淋巴细胞和肾细胞癌作为大肠癌的过继细胞转移的一些障碍。更重要的是，存在针对数千种未知肿瘤相关抗原的肿瘤特异性T细胞受体。肝转移是晚期大肠癌患者最常见的并发症，最终导致死亡。然而，使用最近开发的改进技术消除肝转移是可行的。肝转移可能是理想的肿瘤浸润淋巴细胞来源，可以无菌采集而不会污染肠道菌群，并用于过继细胞转移治疗大肠癌患者。
　　 肿瘤浸润淋巴细胞和肾细胞癌的获取需要精湛的手术技术，这对于晚期内脏癌患者不可行。大多数实体瘤不像黑色素瘤那样具有免疫原性，只有很少的肿瘤浸润淋巴细胞才能进行采集和扩增，无法满足过继细胞转移的要求。而且，离体扩增肿瘤浸润淋巴细胞所需的时间约为1-2个月，这对于患有绝症的患者来说太长了。因此，有必要探索肿瘤浸润淋巴细胞的替代来源。由于外周血单核细胞数量大且分离过程简单，因此已被用作过继细胞转移细胞的来源已有三十年了。外周血单核细胞也可以从患者以外的供体中收获，这对于接受标准化化学、放射疗法的患者是有益的。外周血单核细胞可以在体外刺激用高剂量的白介素-2产生淋巴因子激活的杀伤细胞。外周血单核细胞是一种异质细胞群，包括淋巴细胞，单核细胞和树突细胞，淋巴细胞通常在70-90％的范围内。外周血单核细胞不仅可以用作完整的异质细胞库，还可以纯化为单个表型细胞。它们可以在激活后以其自然状态使用，可以通过不同的程序扩展，也可以通过各种人工或选定的基因进行基因工程改造以增强其持久性和特异性。
　　 T淋巴细胞以T细胞受体依赖性方式工作，因为免疫监视和突变细胞根除依赖于T淋巴细胞表面上T细胞受体对异常抗原的识别。然而，大多数癌细胞缺乏特异性抗原表达或人免疫复合物I类分子的表达下调，因此不能被效应T细胞识别。肿瘤特异性肿瘤浸润淋巴细胞可能引起自然发生的抗肿瘤反应，但是它们可能数量很少或受到免疫抑制机制的抑制。为了克服这个问题，一种可行的方案是利用人造T细胞受体或筛选靶向癌细胞过度表达但未被正常细胞表达或以低水平表达的抗原的天然存在的T细胞受体，并用这些T细胞受体基因改造注入的细胞。
　　 尽管过继细胞转移在癌症治疗中的治疗潜力已得到越来越多的重视，但是过继细胞转移在大肠癌和其他实体瘤治疗中的有效性仍然存在许多障碍。这些缺点包括在免疫抑制性肿瘤微环境中短暂的持久性和免疫细胞的不良运输，无能以及免疫细胞的弱和不充分增殖以及在肿瘤消退后去除基因工程化的T细胞。这些问题中的一些可以通过更好地操纵工程T细胞来解决。但是，上述大多数障碍只能通过其他治疗方法，例如化学疗法或放射疗法，手术以及使用检查点抑制剂，单克隆抗体，树突细胞疫苗，甚至一些可以调节癌细胞新陈代谢和免疫微环境的小分子。由于实体瘤非常异质并且可能具有多种免疫抑制机制，因此有必要探索更有效和个性化的策略以增强过继细胞转移的疗效。
　　 过继细胞转移的大多数临床前和临床研究都使用未选择的T细胞，包括细胞毒性T细胞，辅助性T细胞，甚至是免疫抑制性调节T细胞细胞，因为如果没有辅助性T细胞，细胞毒性T细胞就无法增殖。过继细胞转移的另一个关键问题在于用于编辑转移细胞的基因。天然存在于体内抗肿瘤反应提示存在肿瘤特异性抗原决定簇和T细胞受体。然而，尽管该技术取得了相当大的进步，但是在数十亿候选者的全部库中很难识别出这些表位或T细胞受体。分子的设计可能对过继细胞转移的成功应用提出另一个挑战。CD3和CD28信号通路对于T细胞启动的启动很重要，但如果反复刺激，则会对T细胞的活化和增殖产生不利影响。这可能是转移的细胞无反应的原因之一，因为此细胞被设计为强制激活CD3和CD28信号通路。由于白介素信号通路是维持活化T细胞功能和增殖的主要机制，因此该方法可能代表了过继细胞转移基因设计的另一种有希望的策略-刺激白介素信号通路。人们相信，单独或与其他疗法联合使用过继细胞转移可能对大肠癌和其他癌症的治疗具有广阔的前景。