巨噬细胞与胰腺癌免疫治疗

　　巨噬细胞在胰腺癌的侵入前存在有助于肿瘤进展和淋巴管生成，并与淋巴结转移和差的存活相关。最近的一项研究表明，源自胰腺癌细胞系的外分泌体会导致巨噬细胞的肿瘤前表型改变。当用腹水来源的，高度转移性的AsPC-1胰腺癌细胞系处理巨噬细胞时，在巨噬细胞中这种免疫抑制表型的诱导更加突出。此外，用AsPC-1衍生的外分泌体处理的巨噬细胞分泌增加数量的几种生长因子和细胞因子，这些因子在促进胰腺癌进展，转移和血管生成中起关键作用。处理过的巨噬细胞分泌前列腺素E2的数量也增加了。这特别相关，因为前列腺素E2可以抑制树突状细胞的成熟及其在肾癌中的浸润，从而预防CD8+T细胞活化。肺癌细胞条件培养基上存在的前列腺素E2也已显示出诱导调节性T细胞分化和激活的作用，从而促进调节性T细胞的抑制功能。如果推断到胰腺导管腺癌，这些发现意味着胰腺癌外分泌体对巨噬细胞的影响可能有助于在胰腺导管腺癌中建立免疫抑制微环境的髓源性抑制细胞也都在胰腺癌微环境大量存在，并且对维持免疫抑制微环境的贡献很大。研究表明，源自人胰腺癌细胞的外分泌体具有在体内诱导髓样细胞向骨髓源性抑制细胞分化的能力。后面的髓源性抑制细胞所观察到的渗透机制在胰腺导管腺癌也在研究之中。人外周血单核细胞与来自BxPC3胰腺癌细胞的外分泌体一起孵育会导致髓源性抑制细胞群体的增加和树突状细胞的减少。尽管这些作用似乎与Smad4表达无关，但缺乏Smad4的BxPC3细胞的外分泌体促使髓样细胞更有效地获得免疫抑制表型，其特征是钙通量和糖酵解增加。实际上，BxPC3-Smad4+衍生的外分泌体包含hsa-miR-494-3p和糖酵解酶，这些酶被转移到髓样细胞中以调节钙通量和糖酵解。
　　 胰腺导管腺癌的特征在于其高转移潜能，其可能被癌症外分泌体所增强。由于其进入循环系统的能力，肿瘤来源的外分泌体可以传播到远处的器官并调节其环境，从而将原本不利于肿瘤细胞黏附敌对环境转变为允许的生态位。胰腺癌衍生的外分泌体主要位于肺和肝，其受到特定外分泌体整合素的显着调节。实际上，除了调节原发性肿瘤床内免疫细胞的募集，增殖和活化外，胰腺癌衍生的外来体还被证明在远处器官中起着相似的作用，从而促进了骨髓衍生细胞和细胞的募集。在肝脏建立有利于致瘤的土壤。向原位胰腺癌模型注射源自Panc02-H7细胞的外分泌体，并表现出高水平的循环髓源性抑制细胞和肝脏中髓样细胞的浸润增加。Panc02-H7外分泌体也触发了这些髓样浸润液中Stat3的激活。这可能会导致髓样细胞的免疫抑制功能激活，并有助于建立允许甚至支持转移灶发展的免疫抑制微环境。然而，胰腺癌衍生的外来体在远处免疫耐受背后的事件级联仍然难以捉摸，应作为进一步研究的主题。
　　 当前可获得的绝大多数数据表明外分泌体在胰腺癌中具有免疫抑制作用。与外分泌体功能和含量以及胰腺癌细胞探索的通过外分泌体诱导免疫抑制微环境的机制有关的任何发现都是开创性的。应集中精力确定这些发现与癌症治疗相关的方式，以及是否可以靶向或改变癌症外分泌体以促使患者自身的免疫系统根除癌细胞。
　　 外分泌体作为肿瘤特异性抗原和免疫调节药物的纳米载体的使用现在被认为是治疗癌症的有前途的方法。由于其内源性来源，并进行不同类型的分子，包括蛋白质，脂质容量，和RNA，相比于其它纳米粒子外分泌体有多重优势。最令人鼓舞的优点之一是外来体的无毒和非免疫原性。实际上，由于它们是内源性的，出国看病服务人员希望外分泌体不会对患者造成严重的反应，这与基于脂质的纳米载体不同。脂质体相关的毒性是其合成性质和聚合物核心所固有的。因此，脂质体识别为外来并能触发过敏反应，其特征是强烈的先天免疫应答。此外，外分泌体是出国看病服务人员生物体内大多数细胞自然分泌的。通过探索使用患者自身的健康细胞生产用于癌症治疗的外分泌体，可以避免对载体的不良免疫反应。此外，据报道，外来体可通过CD47循环巨噬细胞和单核细胞，从而避免吞噬作用。此外，外分泌体在体内将靶向KRASG12D的RNAi分子递送至胰腺癌细胞方面显示出比脂质体更高的功效，这在一定程度上受CD47保护功能的促进。外来体也屏蔽和提高它们的内容的稳定性和生物利用度通过循环否则会迅速降解。在另一方面，外来体小尺寸使它们通过天然屏障渗透，包括血脑屏障，并到达组织内部的深处。外分泌体采取了由特定靶细胞，这似乎是由特定粘附分子，整联，和四次跨膜蛋白的存在下，外来体表面上调节的过程。例如，源自Tspan8表达细胞的外分泌体优先被CD54+胰腺和内皮细胞吸收。因此，未来基于外分泌体的疗法可利用该特征靶向特定细胞。但是，这种特性还表明，不应该轻视使用外来体作为免疫调节药物的载体。外分泌体表面蛋白的微小变化会改变外分泌体的特异性，因此对外分泌体的正确工程改造必须具备广泛的外分泌体生物发生和靶细胞的知识。外来体的表面上的特定蛋白质的表达可以通过在原籍细胞上调这些蛋白质来控制。也可以通过将超顺磁性纳米粒子锚定到外分泌体来改善肿瘤细胞的靶向，这些外分泌体通过中等磁场“导向”肿瘤。一旦进入该接收单元中，外来体的货物被释放到细胞质中，诱导所述蛋白质表达变化，信号传导途径的激活状态，和细胞的表型。此外，外分泌体既可以通过胞吞作用进入接收细胞，也可以与受体细胞的质膜融合，然后融合存在于外分泌体膜中的蛋白质。因此，外来体是用于将免疫调节剂递送到特定靶细胞中以阻断免疫抑制或刺激抗癌免疫应答的潜在有用的工具。然后可以将这两种方法与标准化学疗法药物联合使用，以最大程度地消除胰腺癌细胞，同时将副作用降至最低，从而允许手术切除否则无法手术的肿瘤并增加患者的生存率。
　　 各种研究表明，癌症来源的外来体与胰腺导管腺癌中免疫应答的调节之间存在关联。外来体也可用于抗癌药物和其它分子，例如针对突变体KRAS的RNAi递送有价值和有效的工具，特异性靶向胰腺导管腺癌癌细胞。总之，可以预见到，在临床环境中使用外分泌体可以彻底改变癌症和其他病理学的治疗方法。因此，有必要进一步研究外分泌体在癌症和免疫调节中的作用，并将这一知识用于开发基于外分泌体的新疗法。