树突细胞和巨噬细胞诱导白介素

　　已知树突状细胞的亚型是基础水平上白介素的主要产生者，LCL161可以在树突细胞和巨噬细胞中诱导白介素，在树突细胞中具有更高的诱导率。为了研究体内白介素的产生，出国看病服务人员进一步分析了延时活体内显微镜记录。出国看病服务人员在LCL161处理后鉴定了两个表达白介素的免疫细胞群。第一批人群包括能动性的，伸长的细胞，其中太平洋蓝葡聚糖的内在化程度最低，这些细胞对黄色荧光蛋白报告基因呈阳性。第二群是无柄的圆形细胞，具有高水平的太平洋蓝葡聚糖和较低水平的黄色荧光蛋白报告基因。基于形态和太平洋蓝葡聚糖水平，这些组可能分别对应于树突状细胞和巨噬细胞。树突状细胞比巨噬细胞更强烈地诱导白介素的可能性与上述体外数据一致。
　　 为了进一步研究药效学，出国看病服务人员考虑了LCL161-CDNP在机体水平上对白介素产生的影响。收集来自经LCL161-CDNP处理的小鼠的肿瘤，引流淋巴结和腋窝淋巴结，并对细胞白介素-黄色荧光蛋白强度进行定量。出国看病服务人员发现，肿瘤和引流淋巴结对白介素-黄色荧光蛋白细胞呈强阳性，共聚焦显微镜证实了这些发现。这些结果表明，白介素的抗肿瘤作用主要来自肿瘤附近的髓样细胞。注意，这与先前的生物分布研究一致，该研究表明纳米颗粒高度集中在肿瘤中。
　　 刺激白介素的产生，主要在树突状细胞和巨噬细胞中产生，已经成为癌症免疫疗法的治疗策略。白介素通过多种细胞类型中的多种机制引发抗肿瘤反应。此外，已经显示白介素促进干扰素-γ产生，从而激活T和自然杀伤细胞，增强其细胞毒性并触发Th1型应答。在非免疫细胞类型中的各种其他机制，例如肿瘤脉管系统的抗血管生成作用也可能与肿瘤免疫浸润有关，并且可能与之互补。最后，已经表明在特定的肿瘤相关树突状细胞亚群中白介素的产生对于成功进行抗肿瘤免疫反应至关重要。
　　 临床试验中有许多增加肿瘤白介素产生的策略，这是一种将白介素质粒直接递送至肿瘤的电穿孔方法。此外，针对抗原呈递细胞表达的48kDaI型跨膜蛋白CD40的激动抗体已显示可增加白介素并抑制肿瘤生长。各种抗体，也在临床试验中使用。在这里，出国看病服务人员探索了一种不同的策略，即阻断非规范的途径抑制剂。先前已经描述了细胞凋亡的小分子抑制剂，但具有递送挑战和相当大的副作用。出国看病服务人员通过将LCL161与亲水CDNP络合来避免了这些问题。后者对吞噬性髓细胞具有亲和力。当显示为单药治疗时，出国看病服务人员显示出肿瘤白介素产生增加了10倍，缺乏全身毒性，且药效不高。
　　 免疫治疗剂的当前景观涵盖了许多方法，包括小分子，生物制剂，细胞疗法和基因疗法。当前文章中描述的方法是互补的，并且具有潜在的优势。通过使用小分子，出国看病服务人员避免了一些与生物制剂和蛋白质治疗有关的挑战。小分子也更可能进入细胞内靶标。通过靶向细胞内下游节点细胞凋亡1/2，出国看病服务人员在理论上将针对靶向细胞表面免疫突触的生物制剂经常发生的耐药性机会降到最低。在小分子空间内，目标的选择有些独特。迄今为止，大多数小分子免疫激活剂靶向模式识别受体，而出国看病服务人员以相对较少的探索路径为下游节点。另外，尽管LCL161对本研究中使用的MC38细胞系无毒，但据报道对其他细胞系具有促凋亡作用。因此，在临床环境中它可能同时发挥促凋亡和免疫刺激作用。实际上，如果它们确实并存，出国看病服务人员希望这些效果能够协同作用。最后，LCL161已经在临床试验中，因此，如前所述，它有可能被迅速重新利用。
　　 出国看病服务人员将小分子与纳米颗粒配方相结合，以增强递送效果。药物-纳米颗粒制剂的系统递送可能增加这种疗法所需的剂量和成本，但是随着肿瘤内给药的出现，较低的剂量最终可能变得足够。纳米颗粒在肿瘤中的保留时间也更长，这导致大分子在肿瘤中积累。这也可能限制所需的剂量，从而限制全身性暴露于药物。总体而言，出国看病服务人员的方法将现有的小分子药物与新颖而通用的递送系统结合在一起，以最大限度地发挥治疗功效。
　　 将来，出国看病服务人员设想将白介素刺激与检查点封锁相结合。这种方法的基本原理很明确：对抗程序性死亡受体治疗的有效抗肿瘤反应需要肿瘤浸润的树突状细胞产生白介素才能促进抗肿瘤反应。鉴于LCL161诱导树突状细胞中大量白介素的产生，将LCL161纳米制剂与检查点封锁相结合的疗法可能有效。最后，除了其免疫刺激作用外，LCL161还通过限制X连锁凋亡蛋白具有直接的促凋亡作用。尽管未在本研究中进行探讨，但将LCL161与CDNP络合应导致某些递送至肿瘤细胞，如通过从免疫细胞中局部释放，导致癌细胞凋亡。随后的细胞死亡甚至可以进一步增强免疫原性，助长更强的抗肿瘤反应。LCL161以及其他细胞凋亡抑制剂代表了一种有吸引力的治疗剂，可用于癌症免疫治疗和纳米材料的界面。
　　 有效的程序性死亡受体治疗需要有足够水平的肿瘤内白介素，通常由肿瘤微环境中的DC3细胞产生。受此发现的启发，出国看病服务人员进行了小分子筛选以鉴定白介素诱导剂，并发现凋亡的细胞抑制剂
　　 T细胞恶性肿瘤涵盖了一组异质性疾病，每种疾病都反映了功能异常T细胞在不同发育阶段的克隆进化。T细胞急性淋巴细胞白血病分别占15％和儿童和成人病例的25％，并且是T细胞癌的最常见的形式。T淋巴母细胞淋巴瘤是一种非霍奇金淋巴瘤，其生物学特性与T细胞急性淋巴细胞白血病相似。成人T细胞白血病或淋巴瘤是血液癌症的一个非常侵略性的形式，由人T细胞淋巴细胞病毒1型从动。T细胞白血病的其他罕见形式包括T细胞大颗粒性淋巴细胞白血病和T前淋巴细胞白血病。T细胞淋巴瘤大致分为两类，皮肤T细胞淋巴瘤和周围T细胞淋巴瘤。霉菌病和恶性皮肤网织红细胞增多综合征代表皮肤T细胞淋巴瘤的两种最常见亚型，占大多数病例。周围T细胞淋巴瘤可以分为几种不同的亚型，包括间变性大细胞淋巴瘤，血管免疫母细胞T细胞淋巴瘤，自然杀手T细胞淋巴瘤，肠病相关T细胞淋巴瘤，肝脾T细胞淋巴瘤和周围T细胞淋巴瘤，它是该组最常见的。
　　 T细胞恶性肿瘤的总体预后因疾病类型而异，但与B细胞恶性肿瘤相比，通常要差得多。而在T细胞急性淋巴细胞白血病生存化疗已显著改善，仍然是对患者非常有限的复发或难治性疾病。淋巴瘤仍然是一个非常具有挑战性的疾病治疗，具有少于12个月为这种疾病急性形式的中位生存期。晚期皮肤T细胞淋巴瘤为5年中位总生存期，而周围T细胞淋巴瘤的结果取决于亚型，与自然杀手T细胞淋巴瘤，肠病相关T细胞淋巴瘤和肝脾T细胞淋巴瘤具有预后最差的变化。尽管免疫疗法通过使用单克隆抗体，检查点抑制剂，双特异性T细胞接合剂和嵌合抗原受体T细胞疗法彻底改变了各种癌症的治疗方式，但在T细胞疾病中仅观察到有限的反应。一些有希望的结果被看作与使用CD30的免疫毒素有关，在CD30阳性周围T细胞淋巴瘤和皮肤T细胞淋巴瘤使用帕姆单抗，一个程序性细胞死亡受体抑制剂，自然杀手T细胞淋巴瘤的治疗;但是，这些积极结果仅限于T细胞疾病的非常特定的亚型。尚未成功转化为T细胞恶性肿瘤的免疫疗法的一种形式是基于嵌合抗原受体的免疫疗法。近期食品和药物管理局批准本病使用嵌合抗原受体T细胞疗法在复发或难治性B细胞恶性肿瘤非常成功的两个嵌合抗原受体T细胞疗法。然而，实施该技术来治疗T细胞恶性肿瘤一直很困难，这主要是由于在癌性T细胞中缺乏肿瘤特异性表面抗原。在这篇综述中，出国看病服务人员将讨论将这项新技术转化为T细胞疾病所涉及的挑战，回顾在使该疗法适应这种具有挑战性的疾病方面取得的所有临床前和临床进展，并探讨该创新疗法未来发展的潜在解决方案。
　　 原代T细胞的基因工程首次提出于1980年代后期。从那时起，嵌合抗原受体T细胞已成为治疗复发或难治性恶性肿瘤的有前途的技术。嵌合抗原受体疗法汇集了许多领域，包括免疫学，肿瘤生物学，基因工程，合成生物学和药理学。嵌合抗原受体由来自天然T细胞受体CD3的细胞内信号结构域组成，该结构域与用作抗原识别结构域的单链可变片段连接。片段序列通过将可变的重链和轻链域，使用小肽接头。常用的嵌合抗原受体还包括一个或两个共刺激域。尽管动力学尚未完全阐明，但至关重要的是，嵌合抗原受体T细胞必须具有向肿瘤部位转运的机制，在该部位，它们可以识别其同源抗原。这导致嵌合抗原受体T细胞活化和扩增，最终导致针对表达靶抗原的细胞的细胞溶解活性。与基于T细胞受体的配体识别相比，基于嵌合抗原受体的配体识别具有优势，因为嵌合抗原受体靶向不受主要的组织相容性复合物相互作用的限制。因此，嵌合抗原受体可以识别抗原呈递细胞尚未处理和呈递的细胞表面蛋白。此外，与使用具有相同抗体的靶向抗体方法相比，由嵌合抗原受体及其配体之间的相互作用形成的免疫突触可能导致更大的功能亲和力。
　　 靶向B细胞抗原CD19的嵌合抗原受体已被广泛研究用于治疗B细胞恶性肿瘤。2017年，食品和药物管理局批准了首个嵌合抗原受体T细胞疗法，一种CD19导向的嵌合抗原受体疗法，用于治疗复发或难治性B细胞急性淋巴细胞白血病。2018年，嵌合抗原受体获批用于治疗复发性弥漫性大细胞B细胞淋巴瘤。这些疗法，包括其他在临床试验中，已广泛成功地消除恶性细胞和再诱导，缓解患者疾病的难治性。接受嵌合抗原受体疗法的患者会进行白细胞分离术，从而收集T细胞，然后使用慢病毒或逆转录病毒载体对其进行修饰以表达嵌合抗原受体。这些细胞在患者经历淋巴结清扫过程中离体扩增，该过程涉及化学治疗剂。最后，将嵌合抗原受体T细胞重新注入患者体内。重新输注的自体T细胞的淋巴细胞清除之前已经显示出增强两轿厢的T细胞增殖以及持久性。嵌合抗原受体T细胞的给药剂量和先前存在的肿瘤负担似乎并不是T细胞扩增，植入和整体反应程度的唯一决定因素。可能涉及其他因素，例如癌细胞上同源抗原表达的密度。然而，嵌合抗原受体T细胞的持久性的最佳程度需要防止复发白血病尚未确定。
　　 CD19嵌合抗原受体T细胞治疗后复发的机制之一是由于表面抗原逸出，复发性白血病细胞CD19阴性。该结构可以在顺序是由于CD19阴性癌细胞或可替代地，细胞可以从细胞表面下调CD19的一个小的子集的扩展，以逃避检测通过嵌合抗原受体T细胞，使它们耐受。此外，最近发现，一种称为“吞噬作用”的现象是抗原逃逸的机制，由此抗原被转移至嵌合抗原受体T细胞。还显示了用抗CD19嵌合抗原受体转导单个白血病母细胞并重新注入B细胞急性淋巴细胞白血病患者，最终导致患者复发和死亡。白血病细胞的转导通过嵌合抗原受体和同一细胞上同源抗原之间的相互作用导致靶抗原被掩盖。该人群的克隆扩增导致对嵌合抗原受体治疗的抵抗。该报告强调了严格，完美地分离正常，健康的T细胞对于用嵌合抗原受体构建体进行修饰的重要性。正如出国看病服务人员在下面讨论的那样，这在T细胞白血病患者中尤其具有挑战性，他们更可能具有循环性癌性T细胞，因此更有可能无意中分离，转导和重新注入这些细胞。