免疫检查点封锁可抵抗多种类型的癌症

　　过去几年见证了许多用于癌症治疗的免疫治疗策略的加速发展。免疫检查点封锁现已证明可抵抗多种类型的癌症。尽管取得了这些令人鼓舞的结果，但仍然存在重大障碍。副作用并不少见，免疫疗法仅对一部分患者有效。为了进一步改善检查点疗法，最近的一系列研究集中在阐明体内的细胞作用机制，以便更好地了解有限的治疗功效和耐药性。通过这些研究和其他研究，人们逐渐了解了髓样细胞先前未被重视的作用。结果，出国看病服务人员现在知道有效的抗程序性死亡受体治疗需要髓样细胞特别是树突状细胞在肿瘤内产生白介素。
　　 几种治疗策略可增强肿瘤环境中白介素的产生。直接地，由于广泛的免疫毒性，全身性地施用细胞因子的成功有限。更具选择性的肿瘤传递的替代策略包括瘤内注射，通过病毒载体传递和用白介素阳性肿瘤细胞接种疫苗。树突状细胞和其他髓样细胞中白介素的产生也可以通过使用激动性抗体刺激细胞坏死因子受体超家族成员。最后，另一种策略是通过某些髓样途径的小分子抑制剂增加白介素的产生。小分子可以进入细胞内靶标，可以快速重新利用，并且相对便宜。不幸的是，许多现有的小分子药物类别对白介素产生的作用尚不明了，没有针对髓样细胞，具有不良的药代动力学，并且在全身给药时表现出脱靶毒性。
　　 出国看病服务人员假设可以通过对报告细胞中白介素产生的高内涵筛选来确定药理候选物并对其进行排序。此外，出国看病服务人员预期可以使用纳米制剂将抑制剂递送至肿瘤髓样细胞以增强肿瘤微环境中局部的白介素产生。先前的研究表明，小分子生物材料载体是一种在肿瘤微环境中更选择性地将药物递送至吞噬细胞的有效策略。纳米载体还可以溶解本来相溶解性差的药物，从而通过修饰药物药代动力学来增强免疫调节作用。然而，迄今为止，几乎没有开展工作来确定这种策略如何在体内激活肿瘤性髓样细胞向免疫治疗关键性的白介素产生状态。
　　 在本文中，出国看病服务人员开发了并在骨髓来源的树突状细胞中使用了小分子高含量筛选技术，以鉴定可增强白介素产生的化合物。在筛选的化合物中，多种细胞凋亡抑制剂通过激活非规范核因子B途径促进了白介素的产生。随后，出国看病服务人员关注了特定的细胞凋亡抑制剂LCL161，该药物具有出色的药物活性，但由于相溶性差，因此药理作用有限。出国看病服务人员成功地将LCL161与环糊精纳米颗粒进行了复合，从而可以递送至丰富的瘤内髓样细胞。环糊精纳米颗粒的单药治疗减缓了肿瘤的生长，实时玻璃体内成像证实产生白介素的免疫细胞浸润明显增加。
　　 出国看病服务人员开发了一种高内涵筛选方法来鉴定白介素诱导剂。出国看病服务人员使用市售的白介素报告基因小鼠。这些小鼠具有内核糖体进入位点增强的黄色荧光蛋白序列，该序列插入内源性白介素B基因的下游，编码白介素的p40亚基。出国看病服务人员通过用重组鼠类FLT3配体处理骨髓细胞来生成树突状细胞。将细胞接种到384孔板中。9天后，将细胞用化合物处理27小时。出国看病服务人员以1/2对数滴定筛选了7种剂量范围从31.6到31.6μM的42种化合物。处理后，将细胞固定，然后用小麦胚芽凝集素染色，分别标记细胞核和细胞边界。在初步检查出国看病服务人员的数据后，出国看病服务人员在黄色荧光蛋白信号中观察到相当多的单细胞异质性。结果，要为黄色荧光蛋白诱导评分，出国看病服务人员生成了黄色荧光蛋白强度的单细胞分布，并提取了第95个百分点的强度。出国看病服务人员发现，该方法提供了有效区分阴性和阳性对照的可靠信号。
　　 出国看病服务人员对屏幕进行了两次，并通过对两个独立重复样本的平均得分来产生累积得分。每种化合物最终都通过从剂量中捕获的最大作用进行评分。复合评分的等级排序显示，双重TOLL样受体和先天性免疫激动剂是最有效的，符合出国看病服务人员的预期。在TOLL样受体激动剂下方得分的是一组细胞凋亡抑制剂和X连锁凋亡蛋白抑制剂。这些药物是半胱天冬酶模拟物的第二个线粒体衍生激活剂，最初被设计用来使癌细胞敏感以进行凋亡。最近，很明显，这些药物通过抑制细胞凋亡1/2来激活非规范的NF-B途径。所有小分子细胞凋亡抑制剂的得分均支持细胞凋亡抑制，因为这些药物的相关作用机理。出国看病服务人员最终决定将重点放在这些药物而不是TOLL样受体激动剂上，因为尚未充分探索其作为免疫调节剂的潜力。已经在T细胞和自然杀伤细胞中检查了细胞凋亡抑制剂的免疫刺激作用，但针对树突状细胞中其机制的研究才刚刚开始。出国看病服务人员还期望这些药物与纳米材料更兼容，并认为增强体内功效可以通过在肿瘤微环境中进行双重免疫调节以及通过抑制X连锁凋亡蛋白对肿瘤细胞的直接促凋亡作用来实现。
　　 由于缺乏小鼠模型以通过单细胞RNA测序目前可能的分辨率容易地区分骨髓细胞亚群，因此通过活体显微镜对CDNPs在骨髓细胞中分布的药代动力学分析变得复杂。然而，使用荧光标记的CDNPs，出国看病服务人员先前已经显示CDNPs主要定位于肿瘤相关的巨噬细胞，以及较小程度的树突状细胞和嗜中性粒细胞。对出国看病服务人员的活体内成像数据的进一步分析表明，肿瘤细胞未吸收明显数量的CDNP。