细胞免疫疗法治疗不可切除原发性肝癌

　　原发性肝癌是欠发达国家中第二大导致癌症死亡的主要原因，也是发达国家男性中第六大导致癌症死亡的主要原因。其发病率有逐年增加。手术，虽然认为是金标准治疗，适用于患者的原发性肝癌小于20％，由于多发肿瘤，转移，肝功能妥协，或其他有害因素。诊断后，大多数原发性肝癌无法切除。经导管动脉化疗栓塞和索拉非尼治疗在选定的不可切除原发性肝癌人群的随机对照试验中显示出了希望。然而，与经导管动脉化疗栓塞相关的毒性已将其限制用于中期原发性肝癌，索拉非尼仅将整体生存期延长了3个月。随后在药物开发方面的努力失败了。经皮热消融被认为是早期局灶性不可切除原发性肝癌的最佳治疗选择。但是，存在对敏感的邻近器官造成附带热损害的风险：当目标病变位于血管附近时，散热效果可能导致病变的消融不完全，消融区域的形状和大小可能会变大。这种具有挑战性的临床方案为原发性肝癌患者提供了新的，安全的，有效的和延长寿命的策略。
　　 近年来，不可逆电穿孔是在可逆电穿孔技术的基础上开发的一种新的非热微创技术，在临床上已越来越多地使用，不受散热或冷效应的影响。可能导致不完全消融特别是在血管周围的肿瘤细胞，并引起小的损害正常组织，如胆囊，胆管。因此，不可逆电穿孔允许治疗不适合手术切除或热疗法的肿瘤。而且，不可逆电穿孔后仍保留在原位的大量肿瘤特异性抗原缺乏热变性，导致比热消融更有效的免疫反应，从而增强了治疗效果。许多研究已经在以下不可逆电穿孔治疗烧蚀区域示出的免疫细胞浸润。在大鼠中的研究表明，不可逆电穿孔治疗可改变细胞免疫状态，并显着增加外周淋巴细胞和血清细胞因子。但是，不可逆电穿孔继发于原发性肝癌的复发仍是临床中的普遍现象。
　　 基于自然杀伤细胞的免疫疗法的临床应用尚处于初期阶段，自从发现著名的杀伤免疫球蛋白样受体或组织相容性抗原失配后，同种异体自然杀伤细胞就越来越多地用于过继性细胞疗法。出国看病服务人员先前的研究证明了基于自然杀伤细胞的免疫疗法在原发性肝癌患者治疗中的安全性和有效性。不可逆电穿孔结合同种异体自然杀伤细胞免疫疗法已用于胰腺癌的治疗，并且已被证明是安全有效的。但是，联合疗法尚未应用于原发性肝癌的治疗。自然杀伤细胞富含人类肝脏，占肝内淋巴细胞的30–50％。自然杀伤细胞施加的免疫监视对于免疫功能和肝脏对癌症的防御至关重要。在此基础上，出国看病服务人员推测不可逆电穿孔与同种自然杀伤细胞免疫疗法可能是原发性肝癌的有前途的联合疗法。
　　 这是第一项前瞻性研究，评估了不可逆电穿孔和同种异体自然杀伤细胞免疫疗法联合治疗无法切除的原发性肝癌患者的安全性和短期疗效。
　　 不可逆电穿孔作为一种非热消融和微创疗法，在不可切除的原发性肝癌中带来了治疗前景。其高的完全消融率和不受血流吸收影响的无复发期长，使其成为强大的临床工具。但是，先前的研究中仍有许多复发患者。免疫抑制患者的原发性肝癌是导致预后不良，复发和转移的重要因素。鼠的研究表明，不可逆电穿孔治疗具有比那些缺乏完整免疫系统的免疫活性的患者更大的治疗效果。免疫疗法代表了一种有前途的新方法来治疗癌症。但是，仅靠免疫疗法不能有效地防止肿瘤的进展，难以抵消大的肿瘤负荷。近年来，多项研究证实，免疫刺激局部消融治疗的组合似乎是一种可靠的方法，因为免疫治疗可以有效的针对无法通过局部消融控制血液循环的肿瘤细胞。
　　 作为抵抗人体肿瘤的第一道防线，自然杀伤细胞在免疫治疗领域具有良好的前景，因为它们不需要刺激特定抗原。自然杀伤细胞可以通过杀伤免疫球蛋白样受体识别细胞表面上的主要组织相容性复合物I类主要分子，并且当两个分子结合时，自然杀伤的激活受到抑制。因此，除非肿瘤细胞表面的主要组织相容性复合物抗原突变或消失，否则自然杀伤细胞不能被激活。人们普遍认为，杀伤免疫球蛋白样受体或组织相容性抗原不匹配的自然杀伤细胞在治疗恶性肿瘤方面更有效，并且不会引起移植物抗宿主反应。出国看病服务人员之前的研究表明，杀伤免疫球蛋白样受体不匹配的自然杀伤细胞免疫疗法是一种安全的疗法，可提高肝癌患者的免疫功能并降低肿瘤转移和复发率。
　　 不可逆电穿孔的病理生理学仍未完全了解。从理论上讲，非热不可逆电穿孔消融后，特定的肿瘤细胞抗原不会因热疗而降解；它可以作为完整的肿瘤细胞疫苗保存良好。不可逆电穿孔消融肿瘤组织保留了细胞外基质，包括血管结构和淋巴结。不可逆电穿孔后灭活的血管内皮细胞可以再生并重新形成血管，为各种浸润的免疫细胞提供了结构基础。先天性免疫效应细胞将抗原从淋巴管携带到淋巴结，然后在引流的淋巴结中激活抗肿瘤T细胞免疫反应，杀伤性T细胞可以通过循环返回肿瘤部位以根除残留的肿瘤细胞并防止远处转移。与热消融技术相比，不可逆电穿孔能更有效地激活免疫功能并诱导肿瘤免疫反应。在出国看病服务人员的研究中，不可逆电穿孔组中Th1细胞因子和总T细胞的增加表明不可逆电穿孔治疗可增加肿瘤对宿主免疫的敏感性。此外，联合治疗组中Th1细胞因子和总T细胞的增加明显高于单纯不可逆电穿孔治疗。在这项研究中，Th1细胞因子增加了，提示不可逆电穿孔与自然杀伤细胞免疫疗法联合使用可能会改变Th1或Th2的平衡并激活细胞免疫。不可逆电穿孔–自然杀伤组未检测到Th2细胞因子的变化；然而，不可逆电穿孔组的白细胞介素-6明显高于治疗前。出国看病服务人员推测它可能与损伤相关分子模式介导的免疫激活有关。线粒体DNA，热休克蛋白和s100蛋白可以通过损伤相关分子模式模式从坏死细胞中释放出来。
　　 研究表明，不可逆电穿孔不仅可以保护大血管，还可以保留微循环，并增强包括白细胞介素-6在内的细胞因子进入体循环的能力。众所周知，白细胞介素-6具有潜在的致癌能力，与肝癌的进展呈正相关，而对人体的免疫功能则具有负调节作用。在这项研究中，在不可逆电穿孔–自然杀伤组中未观察到白细胞介素-6的显着增加，这表明自然杀伤细胞免疫疗法可以调节和改善细胞免疫反应，积极调节免疫系统功能并提高抗肿瘤作用。但是，其作用的具体机制有待进一步研究。
　　 不可逆电穿孔后立即应用自然杀伤细胞免疫疗法治疗不可切除原发性肝癌的报道尚未见报道。由于原发性肝癌患者的免疫状态和发育背景复杂，因此必须观察和验证其安全性。在该报告中，两组之间观察到的副作用均不明显。反应程度为1级或2级，对症治疗后所有症状均得到缓解。不良反应主要发生在不可逆电穿孔治疗后2周内，只有少数患者在自然杀伤细胞免疫治疗后发烧。这表明不可逆电穿孔与同种异体自然杀伤细胞免疫疗法联合耐受性良好。
　　 总之，这项单中心前瞻性研究已经证明，不可逆电穿孔与异基因自然杀伤细胞免疫疗法联合用于不可切除的原发性肝癌的短期安全性和有效性。但是，该研究具有以下局限性：样本量小且随访时间短。因此，应通过扩大患者人数并增加随访时间来衡量长期疗效。