过继性T细胞免疫疗法

　　过继细胞疗法是指将患者衍生的免疫细胞收集，遗传改造并将其转移到患者体内，其中这些细胞可能源自同一患者或另一个体，分别是过继自体免疫疗法和同种异体免疫疗法。已有报道称有前途的临床前和临床研究部署了基因修饰的T淋巴细胞来介导癌细胞的破坏，例如，急性淋巴白血病对抗CD19嵌合抗原受体修饰的T细胞有显着反应，黑色素瘤患者要向肿瘤浸润淋巴细胞转移。这些令人鼓舞的结果使过继细胞疗法有望抗击癌症或病毒感染。
　　 制药行业已将许多注意力集中在过继细胞疗法上，并且有几家公司在这一领域非常活跃。诺华与宾夕法尼亚大学合作开发了名为Kymriah的免疫细胞疗法的药物，用于治疗难治性或继发性或继发性B细胞前体急性淋巴细胞白血病的25岁以下患者。这种药物于2017年8月30日获得美国食品和药物管理局的批准，并成为第一个授权的基因改造自体T细胞免疫疗法。继诺华成功后，KitePharma公司于2017年10月18日获得了美国食品和药物管理局批准的药物Yescarta，用于治疗经过两次或两次以上全身性治疗的复发或难治性大B细胞淋巴瘤成年患者。细胞生物医学小组进行了一项临床试验，以测试将抗CD20嵌合抗原受体T细胞疗法细胞与减量调理方案相结合治疗晚期化疗难治性晚期弥漫性大B细胞淋巴瘤的疗效，并在2014年报告说这种组合策略可能会导致肿瘤长期消退。2015年，细胞生物医学小组通过一项临床试验研究证明，抗CD19嵌合抗原受体T细胞疗法细胞可有效治疗髓外B-淋巴母细胞性白血病，而无内源性免疫抑制作用。在2017年，同一战略小组从一项I期临床试验结果显示了CD30在控制难治性霍奇金淋巴瘤中的安全性，可行性和有效性。小野制药公司宣布了与Celyad的许可协议，以在日本，韩国和台湾开发针对同种异体嵌合抗原受体T细胞疗法NKR-2的CelyadNKG2D-配体。狮子生物技术获得了美国国家癌症研究所的一项协议，用于开发用于治疗IV期转移性黑色素瘤的肿瘤浸润淋巴细胞。
　　 过继细胞疗法在将免疫反应重新导向癌症和传染病中的基本作用已得到充分认识。然而，由于其固有的复杂性和高度个性化的特性，使生物药物界从过继细胞疗法治疗中获得一致的临床结果并实现过继细胞疗法的大规模生产仍然是一个很大的挑战。例如，优诺治疗公司在2016年的II期临床试验中宣布接受JCAR015治疗后宣布患有急性B‐急性淋巴细胞白血病的患者死亡，而JCAR015在2015年的I期临床试验中被证明有望治愈此类白血病。许多重要的问题，标准化过继细胞疗法制造以减少或消除制造阶段的差异以提高可控性是当务之急和挑战。
　　 基因工程T细胞的临床生产始于获得患者的外周血单个核细胞，将其激活，然后进行基因修饰和扩增，并在输注之前配制或冷冻保存它们。下面，出国看病服务人员讨论了采用密闭系统，自动化，具有成本效益的模型和按设计质量标准化此制造过程的重要性。
　　 细胞制备过程中的每一次操作都可能带来污染产品的风险。维持无菌环境的可靠策略是实施封闭式培养系统，在该系统中，细胞是用封闭的管路和连接件制造的。
　　 封闭的系统允许在10000级环境而不是100级环境中进行制造，而不会影响电池产品的安全性和效率。这具有成本效益，因为根据美国食品和药物管理局无菌指导的规定，建造和运营100类设施要比1万类基础设施昂贵得多。优质培养袋，管配件和连接器的多家分销商以及无菌管焊机使封闭系统的实施成为可能。
　　 但是，实际上，目前尚不具备用于生产过继细胞疗法电池的制造工艺和技术来用于封闭系统。使用实验室级和医院级设备并不总是能够进行封闭系统处理。关键试剂通常使用非封闭系统技术提供。一种可能的解决方案是将这些本身很复杂的关键试剂的生产集成到用于过继细胞疗法生产的封闭系统中，这需要在供应和最终产品的技术和设备上共同进步。另外，拥有精心指定的供应商和详细的供应链跟踪信息。
　　 自动化在标准化复杂过程中特别有用。市场上当前有许多设备可用，每个设备执行过程的各个部分。细胞选择的方法通常基于离心或与抗体的亲和力。基于离心的设备包括例如三分离选粉机，Elutra，SynGenX‐LAB和自动化封闭式梯度离心机系统。三分离选粉机通过密度离心分离血液成分，然后将其泵入不同的袋中，在该袋中将目标细胞收集在细胞存储袋中。Elutra通过将逆流淘析技术与离心技术相结合而与三分离选粉机脱颖而出，该技术可实现基于细胞大小和密度的分离。SynGenX‐LAB和自动化封闭式梯度离心机的设备相似，并且它们都集成到嵌合抗原受体T细胞疗法xpress系统中。自动化封闭式梯度离心机与SynGenX‐LAB的不同之处在于，使用微小气泡作为分离试剂，以促进离心进行细胞选择。关于这些设备的容量和效率，三分离选粉机可用于快速和少量的细胞分离。自动化封闭式梯度离心机适用于大体积细胞分离，其中自动化封闭式梯度离心机具有更高的纯度，但牺牲了更长的处理时间。基于亲和力的方法包括，例如全自动磁性细胞分选仪分离器，细胞分选仪仪器。虽然全自动磁性细胞分选仪分离器和细胞分选仪仪器都使用抗CD3或anti-CD28磁珠进行细胞选择，但全自动磁性细胞分选仪分离器提供了由多个小型操作单元组成的高通量解决方案，而细胞分选仪仪器是用于细胞的全封闭集成自动平台隔离。全自动磁性细胞分选仪具有更高的回收率和纯度以及更少的处理时间，其胜过细胞分选仪，而细胞分选仪由于其更大的处理量而优于全自动磁性细胞分选仪。通过整合全自动磁性细胞分选仪分离器和自动化液体处理站，启动了用于全自动多样品池分离的工作站。细胞选择系统使用IBA的可逆片段色谱柱进行无痕亲和细胞选择，也就是说，使用基于CD特定片段的免疫亲和色谱进行可逆捕获和释放靶细胞。与使用高亲和力抗体的技术不同，细胞选择系统可通过使用全自动多样品池分离的工作站防止不良影响，例如与细胞的不可逆结合，细胞刺激和受体阻滞。DynaMagCTS提供了理想的封闭式无菌系统，具有多种功能，包括细胞分离，激活和扩增。