嵌合抗原受体与肿瘤细胞免疫治疗

　　合适的嵌合抗原受体结构对于激活嵌合抗原受体转导的细胞很重要。大多数嵌合抗原受体-自然杀伤细胞使用作为细胞内信号传导域的第一代嵌合抗原受体构建体，或与其结合表达第二个信号传导域的第二代嵌合抗原受体构建体。通常，自然杀伤细胞中的第二代嵌合抗原受体比第一代嵌合抗原受体具有更高的活性。一些研究基于自然杀伤细胞的激活特征设计了嵌合抗原受体构建体。对于第二代车，重要共刺激分子作为细胞内结构域，其显著增强嵌合抗原受体-自然杀伤细胞的靶向裂解。但是，用于最佳自然杀伤细胞活化的嵌合抗原受体构建体的组合可能取决于肿瘤类型或靶抗原。基于自然杀伤细胞活化受体自然杀伤对自然杀伤细胞活性的重要性以及自然杀伤配体在各种肿瘤上常见的过表达，已开发出一种独特的嵌合抗原受体构建物，其包含自然杀伤作为胞外域并连接作为关键信号分子。这些表达嵌合抗原受体的自然杀伤细胞对多种肿瘤亚型表现出增强的细胞毒性，在急性淋巴细胞性白血病，骨肉瘤，前列腺癌和横纹肌肉瘤中观察到最佳应答。
　　 嵌合抗原受体-自然杀伤细胞的基本原理。嵌合抗原受体包含抗原识别结构域，跨膜结构域和提供激活自然杀伤细胞信号的信号传导结构域。第一代嵌合抗原受体仅包含其作为信号传导域，而另一种因子能作为更好的信号传导域，更好地激活自然杀伤细胞。相比之下，第二代嵌合抗原受体表达第二个信号域与这种因子结合使用。第三代嵌合抗原受体包含两个共刺激信号域。基于自然杀伤激活自然杀伤细胞的机制，开发了一种独特的嵌合抗原受体结构，其中包含自然杀伤作为胞外域，将其作为关键信号分子连接在一起。由抗原结合或自然杀伤诱导的嵌合抗原受体簇及其配体连接引发信号转导，导致自然杀伤细胞活化，对癌细胞的细胞毒性，细胞因子产生，存活和增殖。
　　 出国看病服务机构进行了小鼠临床试验，但是，由于小鼠免疫系统不足，因此无法观察免疫系统的变化，免疫细胞与肿瘤细胞的相互作用以及重要的是嵌合抗原受体-自然杀伤或嵌合抗原受体-T治疗对宿主免疫细胞的影响。肿瘤微环境。由于将人类造血干细胞移植到免疫缺陷小鼠中而发展出功能性人类免疫系统的人性化小鼠，用于缩小肿瘤微环境的间隙。迄今为止，已将人源化小鼠用于评估某些嵌合抗原受体-T细胞疗法的安全性和有效性。例如，将靶向嵌合抗原受体-T细胞转移到造血重建的异种移植小鼠中，以评估对正常造血干细胞的靶向与非肿瘤毒性。用人源化的小鼠模型评估了一种新的联合免疫疗法，该疗法由靶向人抗碳酸酐酶的嵌合抗原受体-T细胞组成，工程化后可分泌人抗编程死亡配体1抗体，从而观察其对T细胞衰竭的逆转和自然杀伤细胞募集促进肿瘤部位。总体而言，人源化小鼠是基于嵌合抗原受体的免疫疗法的临床前试验的更精确模型。
　　 两项临床试验集中于表达特异性嵌合抗原受体的人类原代自然杀伤细胞，以治疗谱系急性淋巴细胞性白血病。第一项试验在圣裘德儿童研究医院进行，并且第一阶段已经完成。在该试验中，用辐照过的表达膜结合配体的细胞作为饲养细胞，以促进供体自然杀伤细胞的扩增，然后转导靶向细胞。嵌合抗原受体。第二项临床试验。然而，脐带血自然杀伤细胞的转导效率达到73％，足以将嵌合抗原受体引入脐带血自然杀伤细胞。然而，外周血来源的自然杀伤细胞的慢病毒转导效率需要改善。
　　 由于插入突变的高风险和用于临床治疗的病毒载体的高成本，非病毒载体已引起越来越多的关注。非病毒载体，例如裸露的基因，具有一些优点，例如，它们便宜且免疫原性低，但是不能将转基因整合到基因组中。非病毒睡美人转座子系统是一种备选的基因转移系统，结合了病毒和非病毒载体的优点，因为它们介导了稳定的转基因表达。非病毒睡美人转座子系统通过双组分载体系统转移基因，该系统由一个转座子组成，该转座子包含侧接反向末端重复的目标基因和一个转座酶重复并“剪切并粘贴”转座子以整合到基因组中。一些研究小组已经成功地应用了非病毒睡美人转座子系统到嵌合抗原受体转基因在使用电穿孔的T细胞。已赞助I期试验，该试验使用非病毒睡美人产生特异性嵌合抗原受体-T细胞，用于治疗自体或同种异体患者接受嵌合抗原受体-T细胞输注作为辅助疗法的晚期非霍奇金淋巴瘤和急性淋巴细胞白血病患者设置。结果确定84％的嵌合抗原受体表达没有整合热点。重要的是，自体后30个月无进展生存率和总生存率分别为83％和100％，同种异体后12个月生存率分别为53％和63％。然而，由于电穿孔基因载体对原代自然杀伤细胞的低转染效率和严重的细胞毒性，非病毒睡美人转座子系统将嵌合抗原受体转基因转导至原代自然杀伤细胞的适用性仍然未知。尽管如此，非病毒睡美人转座子系统已被证明可介导脐血来源的造血干细胞和祖细胞中的基因转移69，基于非病毒睡美人的嵌合抗原受体转基因已在后续研究中成功测试。因此，从脐带血造血干细胞和祖细胞中扩增嵌合抗原受体-自然杀伤细胞，然后使用非病毒睡美人转座子系统遗传转移嵌合抗原受体可能是可行的。
　　 除了对嵌合抗原受体-T细胞的大量临床研究之外，最近在2016年和2017年还进行了各种嵌合抗原受体-自然杀伤细胞临床试验。与嵌合抗原受体-T细胞相比，表达嵌合抗原受体的自然杀伤细胞的优势为其应用提供了广阔的前景。针对难治性恶性肿瘤的细胞免疫疗法。但是，仍有待回答的问题。例如，尽管已经提出了许多提高治疗效果的策略和技术，但是嵌合抗原受体-自然杀伤细胞免疫疗法的结果仍然无法预测，特别是在实体瘤中。由于自然杀伤细胞，其包含具有不同的功能特征的不同子集自然杀伤的异质性，需要选择合适的自然杀伤细胞亚群以选择性地扩增和构建特定的嵌合抗原受体-自然杀伤细胞尚待探索。幼稚或类似记忆的自然杀伤细胞是否更适合扩增和转导？由于它们的体内寿命短，自然杀伤细胞可能无法诱导细胞因子靶向效应，但它们在体内的持久性很短，可能会限制其对肿瘤的溶细胞效力。此外，尚未确定改善自然杀伤细胞增殖，活化，细胞因子分泌和细胞溶解活性的嵌合抗原受体的最佳结构。然而，考虑到扩展和遗传控制自然杀伤细胞的临床顺应性技术的最新进展和快速发展，基于嵌合抗原受体-自然杀伤细胞的免疫疗法可能构成癌症治疗的有希望的前景。