自然杀伤细胞在肿瘤细胞免疫治疗中的作用

　　在基于细胞的癌症免疫治疗中，自然杀伤细胞是潜在的效应细胞，特别是在血液系统恶性肿瘤的控制中。嵌合抗原受体是一种人工修饰的融合蛋白，由融合至细胞内信号传导域的细胞外抗原识别域组成。经嵌合抗原受体基因修饰的T细胞已在血液系统癌症的治疗中取得了显著成功。与T细胞相比，嵌合抗原受体转导的自然杀伤细胞具有许多优势，例如临床使用的安全性，它们识别癌细胞的机制以及它们在临床样品中的丰度。在临床前和临床试验中，成功地转导了人类原代自然杀伤细胞和自然杀伤细胞系以表达针对血液癌和实体瘤的嵌合抗原受体。然而，嵌合抗原受体修饰的原代自然杀伤细胞的体外扩增和自然杀伤细胞的低转导效率。已经开发了许多策略和技术来提高基于嵌合抗原受体的免疫疗法的安全性和治疗效果。此外，自然杀伤细胞表达多种活化受体，它们可能特异性识别在肿瘤细胞上表达的配体。基于自然杀伤R识别的原理，针对自然杀伤R的策略正在迅速出现。鉴于本综述所述的有希望的临床进展，基于嵌合抗原受体和自然杀伤R-自然杀伤细胞的免疫治疗可能是有前途的癌症治疗新策略。自然杀手细胞是潜在的效应细胞，在基于细胞的癌症免疫治疗中，特别是在血液系统恶性肿瘤1的控制中。自然杀伤细胞免疫疗法的初步研究采用被白介素2激活的自体自然杀伤细胞。但是，这种方法导致临床效果较差，主要是由于自体自然杀伤细胞受到抑制，因为肿瘤细胞上的自人白细胞抗原分子呈递的配体与自然杀伤细胞上的杀伤抑制受体结合。具有杀伤抑制受体配体不匹配的同种异体或单倍体自然杀伤细胞的转移避免了这种抑制，因为肿瘤细胞“缺乏自我”的识别。因此，同种异体自然杀伤细胞输注是安全的，可以消除白血病复发，而不会导致移植物抗宿主病。然而，随着从外周血纯化过继转移的自然杀伤细胞疗法已被限制，因为这些细胞的寿命短的体内。最近的研究表明，细胞因子可以诱导自然杀伤细胞成为记忆样自然杀伤细胞，在体内具有更长的寿命。通过短暂地用白介素预先激活细胞，类似记忆的自然杀伤细胞在体外和体内均可分化并表现出增强的因子产生和对白血病细胞的细胞毒性。在I期临床试验中，在9例可评估的急性髓性白血病患者中，有5例观察到了临床反应，其中4例完全缓解。重要的是，白介素15刺激的自然杀伤细胞输注在实体瘤的治疗中显示出有希望的治疗效果。具体而言，在接受单倍体干细胞移植后，六名患有难治性实体瘤的小儿患者中有四名表现出临床反应，特别是部分缓解非常好的患者和两名部分缓解的患者。嵌合抗原受体是基于T细胞受体的人工修饰的融合蛋白，由融合到多种细胞内信号传导域的细胞外抗原识别域组成。嵌合抗原受体s的胞外域通常是抗体单链可变片段，可识别特定抗原，而没有主要的组织相容性复合物分子呈递，类似于抗体。细胞内结构域通常包含并被设计为增加T细胞活化。经过基因修饰以表达嵌合抗原受体的T细胞可以直接识别以嵌合抗原受体为靶标的抗原，然后触发T细胞的活化，增殖，对表达嵌合抗原受体特异性抗原的肿瘤细胞的细胞因子分泌和细胞毒性。因此，嵌合抗原受体修饰的T细胞疗法在血液系统癌症的治疗中已显示出显著成功。具体而言，据报道，针对嵌合抗原受体-T细胞可导致急性淋巴细胞性白血病患者的完全缓解率达到70％至90％。然而，嵌合抗原受体-修饰的T细胞表现出对实体瘤差治疗功效。此外，嵌合抗原受体-T细胞的制备通常需要因为由同种异体T细胞的移植物抗宿主病患者的自体细胞，这限制了它们临床应用较广。此外，体内嵌合抗原受体-T细胞的扩增和持久性可诱导促炎性细胞因子的释放，称为细胞因子风暴或细胞因子释放综合征。类似于嵌合抗原受体表达的T细胞，嵌合抗原受体-改性自然杀伤细胞表现出肿瘤特异性靶向改进和细胞毒性对抗癌细胞两者在体外和体内。重要的是，在靶向嵌合抗原受体的免疫疗法中，自然杀伤细胞与T细胞相比具有许多优势。例如，同种异体自然杀伤细胞可以用作效应细胞，因为它们对移植物抗宿主病不负责，因为它们不需要自人白细胞抗原匹配。此外，嵌合抗原受体-自然杀伤细胞可能比嵌合抗原受体-T细胞更安全，因为它们通常不会诱导细胞因子风暴。另外，自然杀伤细胞可以从不同来源产生，例如外周血，脐带血，人胚胎干细胞，诱导性多能干细胞甚至自然杀伤细胞系。在本文中出国看病服务机构将重点介绍嵌合抗原受体修饰的自然杀伤细胞免疫疗法的最新进展，包括在临床前和临床环境中使用嵌合抗原受体修饰的自然杀伤细胞进行肿瘤治疗的优势和当前的进展.
　　 尽管嵌合抗原受体-T细胞疗法在早期取得了成功，尤其是在血液系统恶性肿瘤中，但嵌合抗原受体-T细胞疗法的大规模临床应用可能受到个性化制备和各种副作用，例如细胞因子释放综合征，神经毒性和靶点与肿瘤外效应。鉴于这些问题，已提出自然杀伤细胞是T细胞优良嵌合抗原受体驱动程序。具体而言，与T细胞相比，自然杀伤细胞在基于嵌合抗原受体的免疫治疗中具有多个优势。
　　 首先，表达嵌合抗原受体的自然杀伤细胞在临床使用中可能比嵌合抗原受体-T细胞更安全，并且自然杀伤细胞免疫疗法的安全性已在多个临床领域得到证实。例如，一些I/II期临床试验表明，异体自然杀伤细胞输注的耐受性良好，不会导致移植物抗宿主病和严重的不良反应;因此，自然杀伤细胞是通用的嵌合抗原受体驱动程序，不仅限于自体细胞。由于嵌合抗原受体-T细胞的持久性，嵌合抗原受体-T细胞疗法的主要副作用之一是靶向与非肿瘤效应。例如，靶向的嵌合抗原受体-T细胞可能会由于T细胞的细胞记忆反应以及正常成熟或祖细胞B的侵袭而引起严重且持久的B细胞缺乏症。幸运的是，嵌合抗原受体-自然杀伤细胞在循环中的寿命有限，几乎没有靶向与非肿瘤效应。此外，自然杀伤细胞产生的细胞因子类型与T细胞产生的细胞因子类型不同。活化的自然杀伤细胞通常会产生因子，而嵌合抗原受体-T细胞诱导的细胞因子风暴主要由促炎性细胞因子介导。
　　 第二，除了通过特定嵌合抗原受体-机制杀死靶细胞，自然杀伤细胞可自发地通过经由多种活化受体的识别不同的配体杀死肿瘤细胞，包括天然细胞毒性受体等。这些活化的自然杀伤细胞受体通常识别在免疫细胞的压力下或在肿瘤进化期间的长期治疗下在肿瘤细胞上表达的应激诱导的配体。此外，自然杀伤细胞通过介导抗体依赖性细胞介导的细胞毒性。因此，表达嵌合抗原受体的自然杀伤细胞可以通过嵌合抗原受体依赖性和自然杀伤细胞受体依赖性机制杀死靶细胞，以根除肿瘤相关抗原阳性肿瘤细胞或表达自然杀伤细胞受体配体的肿瘤细胞。确实，临床试验表明，嵌合抗原受体-T细胞无法根除高度异质的肿瘤细胞，而经过嵌合抗原受体修饰的自然杀伤细胞可能能够有效根除长期治疗后可能改变其表型的残留肿瘤细胞。
　　 最后，自然杀伤细胞在临床标本中含量很高，可以从外周血，甚至自然杀伤细胞系中产生。自然杀伤细胞可提供均质的细胞群，并且可以在良好的生产实践标准下轻松扩展以用于更广泛的临床应用，从而能够“现成”生产嵌合抗原受体修饰的自然杀伤细胞。但是，由于其肿瘤细胞系的缘故，必须在输注前进行照射。活化的外周血-自然杀伤细胞表达范围更广的活化受体，无需照射即可给药，从而使其在体内扩增。源自其他部位的自然杀伤细胞结合了外周血-自然杀伤和自然杀伤细胞的优势，因为它们表现出与外周血-自然杀伤细胞相似的表型，并且是同质种群。重要的是，使用非病毒基因转移方法可以很容易地在衍生的自然杀伤细胞中表达嵌合抗原受体。