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脊索瘤在HCB中焦点 |
对形态学和细胞观察与表观遗传分析相结合的当前最新技术进行了最有趣和内容丰富的综述。作者将表观遗传学定义为“由基础DNA序列变化以外的机制引起的表型或基因表达的可遗传变化”。该综述着重于DNA甲基化引起的基因调控。在脊椎动物物种中,大多数DNA甲基化反应仅限于胞嘧啶核苷酸;特别是那些形成5'-胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤-3'二核苷酸的那些。这些CpG位点通常位于基因5'末端的簇中,并称为CpG岛。这些CpG岛的甲基化状态涉及重要的细胞增殖活动,包括发育和肿瘤发生。由于单个细胞可能是表观遗传异质的,因此需要在最少的细胞上结合形态学和表观遗传分析的方法。海外医疗网详细描述了这些方法中的两种:(1)histoendonuclease-linked检测DNA的甲基化位点,(2)挂锁探针和滚环扩增以及它们如何用于检测不同甲基化位点样本。他们通过在两个实施例所示的TATA盒上游的单个CpG基因座上添加甲基化,完成了对新型MeCP2介导的基因沉默机制的描述。方法需要结合形态学与最小细胞的表观遗传分析。作者详细描述了这些方法中的两种:(1)histoendonuclease-linked检测DNA的甲基化位点,以及(2)挂锁探针和滚环扩增以及它们如何用于检测不同甲基化位点样本。他们通过在两个实施例所示的TATA盒上游的单个CpG基因座上添加甲基化,完成了对新型MeCP2介导的基因沉默机制的描述。
小鼠小脑发育和组织发生过程中发生的细胞迁移过程。该评价从对成像方法和分析方案的一般描述开始,以监测开发过程中的细胞迁移。图像分辨率可能对迁移跟踪分析的准确性产生的影响等问题将在下面详细解释。在该一般性介绍之后,该综述着重于与胚胎中的细胞迁移有关的特定方面,导致构成成熟小脑的多层和细胞类型的发育。详细描述了在固定和加工的组织切片以及活细胞模型上进行的实验的结果。该评价得到文献引文的广泛支持,详述了所用的实验和示踪方法,包括在迁移过程中鉴定各个细胞类型所需的表型标记。该评价的结论是,尽管已经获得了详细描述小脑发育的大量信息,但该过程的关键方面,包括与细胞迁移有关的分子机制仍有待阐明。
脊索瘤是源自脊索残余的恶性骨肿瘤,其对常规化学和放射疗法具有高度抗性。由脊索瘤建立的细胞系维持原发性肿瘤的特征,例如不同的细胞质空泡化。脊索细胞通常包含充满液体的细胞器,脊索空泡,代表独特的溶酶体相关结构。由于已经证明化学治疗剂的溶酶体螯合是对不同种类肿瘤的药物抗性机制。已对三种脊索瘤细胞系的液泡系统进行了详细分析,并测试了氯喹单独或与多柔比星联合使用是否具有细胞毒性。使用溶酶体示踪剂红DND-99和对溶酶体膜蛋白LAMP1抗体,被鉴定核周酸性细胞器,包括溶酶体,自噬体,内涵体和吞噬体的巨大数量然而,大液泡,虽然是LAMP1阳性,没有积累溶酶体示踪剂?红色DND-99,被解释为代表脊索空泡的残余物。高压冷冻和冷冻取代细胞的三维重建揭示了溶酶体和线粒体之间的密切关联。脊索瘤细胞系的另一个特征是存在大量糖原,其中一些糖原被糖原去除。最后,使用最高单一试剂模型研究了氯喹和多柔比星对脊索瘤细胞生长的可能的协同作用。但是,没有观察到氯喹的明显效果。
细胞的形状和它们的功能状态是相关的,因此在许多实验和临床研究领域中准确检测形状变化是至关重要的。用于细胞形状的准确形态学分析的新方法的发展及其用于估计两种毒素对鼠神经元NG108-15细胞形态的影响的用途。毒素ostreolysinA和pleurotolysinB成孔复合物引起小鼠神经元NG108-15细胞的广泛形态变化,包括细胞肿胀和质膜起泡。本手稿中介绍的方法包括一种提取细胞轮廓的新算法,以及修改后的圆度测量的使用C?2从共焦图像中获取细胞形状。修改后的圆度测量,它定义了细胞形状与完美圆形的不同程度,能够更好地检测细胞形状的微小变化,从而实现易于检测的数值结果。应用所描述的分割方法并使用该度量有助于检测细胞与泡沫,重要的质膜损伤。尽管应用图像分析来分析对培养的神经细胞的毒素作用,但是提出该方法应该更普遍地适用于细胞形状研究。
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