脑胶质瘤是中枢神经系统中最常见的恶性肿瘤。胶质瘤的进展与复杂的基因相互作用和分子调控网络有关。积累的研究的数量集中在寻找分子调控网络，并探索可靠诊断标志物和有效的治疗靶标。越来越多的长非编码RNA成为肿瘤起源和进展的新调节剂。LNCRNAS的异常表达水平紧密相连的不同类型的肿瘤的恶性行为，包括GBM。例如，LNCRNATSLC1-AS1是神经胶质瘤中的一种新型肿瘤抑制因子。CRNDE作为一种长期的非编码RNA，通过调节MTOR信号传导来增强神经胶质瘤细胞的生长和侵袭。LNCRNAEGFR-AS1是EGFR的反义转录物，在调节各种肿瘤的生长中起关键作用，例如胃癌，肝细胞癌和肾细胞癌。EGFR-AS1对神经胶质瘤进展的影响尚不清楚。MIRNA可结合到靶基因的MRNA的3'-UTR，导致MRNA的降解或翻译过程抑制。MIRNA在调节肿瘤恶性程度中的作用。很少有人报道哪种MIRNA可能是EGFR-AS1可能冥想包括胶质瘤在内的癌症进程的靶标。
　　 在这项研究中，海外医疗网研究人员检查EGFR-AS1在神经胶质瘤发展中的功能。显示在胶质瘤细胞系和组织中EGFR-AS1表达明显上调。功能分析表明，EGFR-AS1抑制可抑制神经胶质瘤的进展。EGFR-AS1充当MIR-133B海绵，而MIR-133B可以靶向RACK1的3'-UTR。总体而言，这项研究的重点是探索EGFR-AS1轴在神经胶质瘤发展中的机制。
　　 RT-QPCR分析表明，与人正常星形胶质细胞相比，人胶质瘤细胞系中EGFR-AS1表达明显上调。表明与NT组相比，人神经胶质瘤组织中EGFR-AS1表达显着升高。为了进一步探索EGFR-AS1在神经胶质瘤细胞中的功能，构建了稳定的EGFR-AS1沉默的细胞。EGFR-AS1击倒CCK8和分析的EDU减少在神经胶质瘤细胞中的细胞增殖。独立于锚固的生长分析证实了EGFR-AS1基因敲低在抑制神经胶质瘤细胞增殖中的作用。与SICTRL组相比，EGFR-AS1敲低显着减少了胶质瘤细胞迁移和侵袭的数量。U87和U251细胞中的EGFR-AS1敲低显着诱导了细胞凋亡。蛋白质印迹分析表明EGFR-AS1的减少导致与转移相关的信号的表达显着下降。EGFR-AS1敲低可高度诱导促凋亡分子的表达，包括BAX，裂解的CASPASE-3和PARP。在BCL-2的表达的变化，这被称为临界抗凋亡信号中检测到相反的结果。EGFR通常在肿瘤发生中起致癌驱动作用。EGFR-AS1转录上EGFR的反义链和具有EGFR部分序列互补。发现在EGFR-AS1敲低的U87和U251细胞中，EGFRMRNA和蛋白表达水平显着降低。免疫荧光分析证实了EGFR-AS1基因敲低的神经胶质瘤细胞中EGFR的减少。这些结果表明EGFR-AS1可以调节EGFR表达以控制神经胶质瘤的进展。
　　 与AST相比，在人神经胶质瘤细胞系中MIR-133B表达水平明显下调。在人神经胶质瘤组织样品中检测到MIR-133B的表达降低。为了进一步探索MIR-133B对神经胶质瘤细胞的作用，将AGOMIR-133B和ANTAGOMIR-133B分别转染到人U87和U251细胞中以分别过表达和抑制MIR-133的表达。MIR-133B过表达抑制了C–E，U87和U251细胞的细胞增殖和生长活力，而MIR-133B敲低表现出较高的细胞增殖和生长能力。与NC组相比，促进MIR133B表达可显着减少胶质瘤细胞迁移和侵袭的数量。抑制MIR-133B会增加迁移和侵袭的神经胶质瘤细胞的数量。MIR-133B的过度表达导致神经胶质瘤细胞凋亡，而MIR-133B的抑制则抑制凋亡。另外，在过度表达MIR-133B的神经胶质瘤细胞中检测到N-钙粘着蛋白，波形蛋白，MMP-2和BCL-2的表达显着降低。BAX，裂解CASPASE-3和PARP表达水平明显上调。这些效应可以通过MIR-133B敲低来逆转。建议EGFR-AS1敲低上调了神经胶质瘤细胞中的MIR-133B表达。为了进一步识别分子机制EGFR-AS1调制的增殖，迁移，浸润和神经胶质瘤细胞的细胞凋亡，EGFR-AS1的靶MIRNA的使用的计算算法进行了预测。MIR-133B被预测为EGFR-AS1的靶标。双重荧光素酶报告基因测定表明，MIR-133B的过表达显着降低了神经胶质瘤细胞中含有野生型EGFR-AS1的报告基因的荧光素酶活性。
　　 与AST组和NT组相比，在神经胶质瘤细胞系和组织中分别检测到RACK1显着升高。与NT相比在神经胶质瘤组织中RACK1蛋白表达增加，与AST相比，在神经胶质瘤细胞中RACK1蛋白表达也增加。胶质瘤细胞的增殖和生长能力通过RACK1的过表达而显着提高，而在RACK1敲低细胞中则受到抑制。RACK1的过表达显着促进迁移和侵袭，同时抑制U87和U251细胞的凋亡。但是，这些影响被RACK1敲低所抵消。在过度表达RACK1的神经胶质瘤细胞中观察到N-钙粘着蛋白，波形蛋白，MMP-2和BCL-2的表达显着增加。相反，RACK1的过表达使BAX，裂解的CASPASE-3和PARP的表达水平显着降低。这些发现在RACK1基因敲低的神经胶质瘤细胞中被逆转。促进MIR-133B表达降低了胶质瘤细胞中RACK1的表达，并且在具有MIR-133B抑制作用的胶质瘤细胞中检测到相反的结果。将RACK1预测为MIR-133B的靶标，并将EGFR-AS1中预测的MIR-133B相互作用位点MIR-133B降低了U87和U251细胞中含有野生型RACK1的报告基因的荧光素酶活性，但未能抑制具有突变的MIR-133B结合位点的报告基因。
　　 为了探讨EGFR-AS1是否参与MIR-133B对神经胶质瘤细胞恶性肿瘤作用的调节，计算了MIR-133B和EGFR-AS1的共转染。MIR-133B过表达的EGFR-AS1沉默进一步促进了仅由EGFR-AS1敲除引起的增殖，迁移和侵袭的减少，而MIRNA-133B抑制则导致EGFR-AS1敲除部分恢复了仅由EGFR-AS1敲低引起的这种减少。与SIEGFR-AS1组相比，在EGFR组中凋亡明显增加，但在EGFR组中凋亡减少。发现EGFR-AS1敲低可降低RACK1表达。EGFR-AS1敲除和MIR-133B过表达的共转染进一步增强了单独由EGFR-AS1敲除引起的抑制作用，而EGFR-AS1敲除和MIR-133B抑制的共转染挽救了抑制作用。为了研究MIR-133B对神经胶质瘤细胞的作用是否可以由RACK1调节，将MIR-133B和RACK1构建体共转染到细胞中。与CTRL组相比，RACK组的细胞增殖，迁移和侵袭减少，而MIR组则升高。另外，细胞凋亡表现出相反的结果。使用由U87和U251细胞驱动的体内肿瘤模型来证实EGFR-AS1在神经胶质瘤进展中的作用。EGFR-AS1显着敲低相比于SICTRL组降低了肿瘤生长和体重。在EGFR-AS1基因敲除样品中检测到MIR-133B的表达增强。EGFR-AS1沉默抑制N-钙黏着蛋白，波形蛋白和RACK1的表达水平，而裂解的CASPASE-3表达增加。H＆E染色表明在EGFR-AS1基因敲低的肿瘤样品中肿瘤细胞密度降低了。最后，KI-67表达水平明显被EGFR-AS1抑制所抑制，而TUNEL阳性水平却发现了相反的结果。
　　 在本研究中阐明了神经胶质瘤细胞系和组织中EGFR-AS1的表达升高。EGFR-AS1抑制可明显抑制神经胶质瘤细胞系的增殖，迁移和侵袭，但可诱导其凋亡。胶质瘤细胞中EGFR-AS1调节的结合性是通过与其MIR-133B的直接靶标结合而实现的，MIR-133B被证实是神经胶质瘤中的一种肿瘤抑制因子。EGFR-AS1沉默也降低了RACK1的表达。此外证实RACK1参与调节MIR-133B诱导的神经胶质瘤细胞恶性活动的抑制。体内研究表明，EGFR-AS1敲低还可以通过阻止肿瘤样品中的增殖，迁移和侵袭并诱导细胞死亡来显着降低肿瘤的生长。
　　 越来越多的证据表明，LNCRNA调节癌细胞的增殖，迁移和侵袭。MIRNA是各种癌症中的一组独立调节剂。MIRNAS是LNCRNAS的靶向基因打坐肿瘤发生。神经胶质瘤的侵略性质归因于强烈的细胞增殖，弥漫性浸润，和高耐凋亡。N-钙粘蛋白是研究得最好的分子之一，在调节神经胶质细胞迁移演奏关键作用。N-钙黏着蛋白的上调具有增殖作用。恶性肿瘤细胞的侵袭和转移行为通常伴随着间质标记物的表达上调。包括MMPS在内的几个基因家族与癌症的侵袭性有关。胶质母细胞瘤中存在MMP-2活性。EGFR-AS1在人类神经胶质瘤组织和细胞系中过表达。EGFR-AS1抑制下调了神经胶质瘤细胞的增殖，迁移和侵袭，这进一步由N-钙粘着蛋白，波形蛋白和MMP-2的表达降低所证明。EGFR-AS1通过促进促凋亡信号，如BAX表达敲低在神经胶质瘤细胞显著诱导细胞凋亡，裂解的CASPASE-3和PARP，这表明EGFR-AS1期间起到癌基因神经胶质瘤进展。在肝细胞癌中，EGFR-AS1的增加预示了不良的预后。EGFR-AS1促进肾癌的细胞生长和转移。EGFR-AS1转录在EGFR的反义链上，与表皮生长因子受体具有潜在的序列互补性。MIR-133B可以通过靶向EGFR抑制结肠癌中的细胞增殖，迁移和侵袭。MIR-133B可通过激活CASPASE-3途径抑制肺癌细胞的存活。EGFR-AS1基因敲低抑制了神经胶质瘤细胞中的EGFR表达。在人类神经胶质瘤组织和细胞中，MIR-133B表达下调。促进MIR-133B表达导致细胞增殖，迁移和侵袭的抑制，而细胞凋亡的升高。MIR-133B可能是EGFR-AS1的靶标，发现证实EGFR-AS1与MIR-133B在肿瘤发生过程中的显着相互作用。EGFR-AS1抑制通过升高MIR-133B表达来干扰神经胶质瘤细胞的迁移，侵袭和凋亡。
　　 RACK1最初被鉴定为蛋白激酶C亚型BII的36KDA细胞内受体。RACK1被上调在多种类型的人类肿瘤，并有助于在人类癌症的进展中起关键作用，包括神经胶质瘤。RACK1抑制通过诱导MIR-302C促进胃癌转移。RACK1表达在胃癌中升高，并与患者预后不良相关。RACK1通过诱导细胞自噬加速结肠癌的致瘤性。RACK1表达在神经胶质瘤组织和细胞中表达上调。RACK1上调升高增殖，迁移和入侵，但抑制神经胶质瘤细胞凋亡反应。这些效应被RACK1敲低所逆转，说明RACK1可能是调节人类神经胶质瘤进展的致癌基因，其受EGFR信号传导调控。在人类神经胶质瘤中，有限的样本数量和EGFR-AS1表达的上游机制也存在局限性。将来，海外医疗网研究人员将研究神经胶质瘤或其他类型肿瘤中EGFR-AS1上调的调节机制。
　　 总之发现表明EGFR在神经胶质瘤的进展中具有重要意义。EGFR-AS1通过促进MIR-133B调节RACK1的稳定性来促进神经胶质瘤细胞的恶性表型。海外医疗网研究人员的结果可能为预防神经胶质瘤生长提供了一种新颖的治疗策略。