肺中NK细胞的抗转移功能

　　转移是癌症相关死亡的主要原因，而肺是常见的受累器官。出国看病服务机构发现，肺部驻留的第2组先天淋巴样细胞的激活有序地抑制了自然杀伤细胞介导的先天性抗肿瘤免疫力，导致肺转移和死亡率增加。使用肺转移的多种模型，出国看病服务机构表明，肺中白介素-33依赖的ILC2激活主要参与促进肿瘤负荷。ILC2驱动的先天2型炎症伴随着干扰素-γ的产生和肺NK细胞的细胞毒性功能的深刻局部抑制。NK细胞依赖ILC2的抑制作用是通过先天的调控机制来完成的，该机制依赖于IL-5诱导的肺嗜酸性粒细胞增多，最终限制了NK细胞的代谢适应性。对IL-33或IL-5的治疗靶向可逆转NK细胞抑制并减轻癌症负担。因此，出国看病服务机构揭示了IL-33和ILC2s通过抑制先天1型免疫能力促进肿瘤转移的重要功能。
　　 许多癌症扩散到肺部，对患者的生存造成严重后果。为了形成肺转移，循环肿瘤细胞必须渗入组织间质并逃避组织驻留的免疫细胞。肺NK细胞是细胞毒性CD8+T细胞的先天对应物，约占人类和小鼠所有肺部驻留淋巴细胞的10–20％。NK细胞对于不依赖抗原的识别和消除浸润的CTC至关重要，这在不存在或受损时压倒性转移负担已得到证实。
　　 ILC2是适应性CD4+TH2细胞的先天对应物。像NK细胞一样，它们在幼稚的肺部中包含组织驻留种群。警报分子IL-33激活肺ILC2，而警报蛋白IL-33从各种免疫和非免疫细胞类型释放，以响应肺损伤，感染或过敏原暴露。ILC2s通过快速释放效应细胞因子以及影响TH2细胞的共刺激配体的表达来介导先天性和适应性2型炎症。ILC2s还与调节性T细胞，这表明免疫抑制功能的潜在贡献。相关地，几个小组描述了可以计数器1型免疫力不同的调节劳工公约免疫抑制分子的或ILC2特异性表达。然而，目前尚不清楚ILC2的生理作用是否超出了调节2型免疫力的范围。
　　 尽管2型炎症在很大程度上与肿瘤的进展有关，但通过2型细胞因子介导的交替激活的巨噬细胞和髓样来源的抑制细胞的极化，IL-33在原发性实体瘤和血液系统恶性肿瘤中均具有抗肿瘤和抗肿瘤功能。类似地，对于ILC2s相对功能已被报道，在原发肿瘤环境。然而，2型炎症与转移的形成相关。鉴于肺ILC2在指导先天性和适应性2型免疫中的核心作用，出国看病服务机构假设转移前小生境中的ILC2激活会影响肺转移的形成。
　　 在这项研究中，出国看病服务机构证明了先前存在的2型气道炎症大大增加了IL-33和ILC2依赖性途径中肺的转移性播种。除了协调2型炎症外，ILC2还可以独立于适应性免疫系统而深刻抑制NK细胞驱动的抗肿瘤免疫。从机制上讲，ILC2通过嗜酸性粒细胞的募集和激活以IL-5依赖性的方式介导其免疫抑制作用。嗜酸性粒细胞可通过调节发炎小生境的代谢环境直接抑制NK细胞功能，但不能抑制ILC2。治疗干预可逆转肺NK细胞的代谢限制，效应分子的产生和抗肿瘤功能。
　　 IL-33驱动的ILC2激活对于促进肺癌转移至关重要
　　 为了评估气道先天性2型炎症对肺转移形成的影响，出国看病服务机构采用了IL-33或曲霉蛋白酶过敏原诱导的气道炎症模型，然后转移性转移转移性B16-F10黑色素瘤细胞。出国看病服务机构注意到到第21天时，转移负荷显着增加，并且IL-33或Asp调节小鼠的死亡率均增加。蛋白酶变应原可以通过IL-33释放激活肺部驻留的ILC2，这主要是由上皮细胞粘附分子+细胞产生的。通过肺嗜酸性粒细胞测定，在14d后急性2型炎症的缓解减弱了IL-33的促转移作用。此外，转移性移植后或非2型诱导炎症剂的鼻内敏化后给予IL-33对转移接种没有影响。接下来，出国看病服务机构评估了IL-33或Asp致敏在肺癌和乳腺癌转移模型中的作用，该研究还显示了IL-33或Asp致敏在乳腺癌转移模型中的作用暴露于先天性2型炎症的小鼠。同样，原位植入的4T1和高度转移性的4T1-T乳腺癌细胞在暴露于鼻内Asp或IL-33的小鼠中均发生了更多的肺转移，而没有影响原发肿瘤的大小。在转移到肺部的乳腺癌的自体模型中，IL-33或Asp治疗同样促进了肺部转移，而不影响原发性肿瘤的大小。因此，出国看病服务机构得出结论，IL-33或过敏原驱动的2型气道炎症显着增加了癌症的肺转移负担。
　　 过敏原暴露导致IL-33释放，导致ILC2s迅速激活，继而导致先天性和适应性2型炎症。出国看病服务机构证实，鼻腔内IL-33诱导ILC2扩增，Asp诱导IL-33依赖性急性2型炎症。为了研究Asp驱动的肺转移是否依赖IL-33，出国看病服务机构在过继转移B16-F10细胞之前用Asp灌注了C57BL/6J野生型和Il33-小鼠。虽然用Asp处理的WT小鼠在第21天有明显更多的肺转移，但出国看病服务机构观察到在Il33-小鼠。由于ILC2是响应急性IL-33释放的主要肺细胞，出国看病服务机构假设IL-33或暴露于过敏原后ILC2可能促进转移性播种。为了测试这一点，出国看病服务机构暴露Il7ra的Cre/+RORAloxP序列/loxP位ILC2缺陷型5或控制小鼠IL-33或天冬氨酸的变应原，然后B16-F10细胞的过继转移和评估的转移负荷。与Il33-小鼠相似，ILC2缺陷小鼠在暴露于IL-33或Asp变应原后产生的肺转移明显少于Ctrl小鼠。因此，出国看病服务机构提出变应原诱导的肺转移形成的促进依赖于IL-33驱动的ILC2s的激活。
　　 IL-33不会促进CTC早期植入肺
　　 为了确定IL-33-ILC2依赖性气道炎症是否会影响发炎的肺毛细血管中CTC的早期阻滞，出国看病服务机构在IL-的早期时间点对B16-F10-mCherry荧光或B16-F10-AkaLuc生物发光细胞进行了定量。33启动或Ctrl鼠标。IL-33引发的肺没有接种更多的CTC，理由是另一种机制可能促进转移性负担。NK细胞对于检测和消除CTC和早期转移性病变至关重要。为了研究IL-33是否在与NK细胞平行的途径中发挥作用，出国看病服务机构询问IL-33引发是否与NK细胞耗竭协同作用。出国看病服务机构首先证实了NK细胞的耗竭导致肺转移形成的实质性增加。此外，出国看病服务机构未观察到NK细胞缺失小鼠中IL-33引发的加性作用。因此，尽管IL-33不会促进肺中CTC的早期停滞，但出国看病服务机构假设IL-33影响NK细胞驱动的抗肿瘤功能。
　　 IL-33抑制肺NK细胞功能
　　 NK细胞是主要的ILC种群，是幼稚小鼠肺中干扰素-γ的主要来源，这与肺NK细胞的抗转移功能有关。IL-33给药适度增加了总肺NK细胞数。出国看病服务机构证实，IL-33给药引起ST2的膨胀+ILC2s，而ST2-。肺NK细胞没有增加Ki-67的表达，提示IL-33对NK细胞有潜在的间接作用。接下来，出国看病服务机构通过检测细胞内IFN-γ，粒酶B和肿瘤坏死因子来评估PBS或IL-33治疗的小鼠中肺NK细胞的功能能力。在用IL-33治疗的小鼠中，出国看病服务机构观察到用佛波12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯加离子霉素或抗NK1.1抗体离体刺激后，IFN-γ的产生显着减少。以及总肺IFN-γ+NK细胞数量的大幅减少。此外，出国看病服务机构观察到GzmB和TNF的产生显着降低。用IL-12和IL-18联合进行离体刺激后，获得了相似的结果。鼻内注射IL-33对循环或脾脏NK细胞功能没有影响或影响很小，尽管心包脂肪NK细胞受到抑制。
　　 出国看病服务机构在时程实验中研究了肺NK细胞抑制的动力学，发现鼻内注射IL-33后，IFN-γ的产生被抑制了约2周，而鼻内LPS治疗的小鼠与基线无差异。抑制与2型炎症呈负相关。值得注意的是，肺CD4+和CD8+T细胞产生IFN-γ的能力不受IL-33处理的影响。而且，与IL-33处理的肺细胞共培养后，从幼稚的小鼠肺中纯化的NK细胞产生的IFN-γ和GzmB受到有效抑制，表明肺炎环境具有有效的免疫抑制特性。相反，从IL-33处理的肺中纯化的NK细胞在与PBS处理的肺细胞共培养时恢复了IFN-γ和GzmB的表达，表明抑制作用是可逆的。接下来，通过体外细胞毒性测定，出国看病服务机构发现来自经IL-33治疗的小鼠的肺NK细胞消除肿瘤细胞的能力受损。
　　 为了评估变应原诱导的IL-33释放是否会影响肺NK细胞，出国看病服务机构用PBS或Asp处理了WT和Il33-小鼠。鼻内Asp给药在第3天导致WT小鼠肺NK细胞功能降低，但Il33-小鼠未降低。豚草花粉的施用类似地损害了肺NK细胞功能。出国看病服务机构还观察到在用IL-33治疗的BALB/c小鼠中CD49b+NK细胞功能受到抑制。此外，在不同动物设施中对C57BL/6小鼠进行的平行实验在NK细胞抑制和IL-33处理增加的转移接种方面产生了可比的结果。综上所述，这些数据表明，过敏原诱导的IL-33释放抑制了肺NK细胞的功能。
　　 ILC2介导先天性免疫检查点对肺NK细胞功能的影响
　　 作为幼稚肺中主要的IL-33应答细胞，ILC2s可能会抑制NK细胞。实际上，IL-33或Asp治疗的ILC2缺陷型小鼠未能抑制肺NK细胞产生IFN-γ和GzmB，或诱导2型炎症。现在，也耗尽了NK细胞的ILC2缺陷型小鼠容易受到转移性播种的影响，支持以下假设：ILC2介导的NK细胞抑制在促进肺转移形成中很重要。相关地，IL-33致敏作用不影响NK细胞缺乏ILC2缺陷小鼠的转移接种。尽管这些数据表明ILC2s可能通过直接的AMP介导的通路影响肺NK细胞功能，但出国看病服务机构发现体外肺ILC2和NK细胞共培养以及体内对A2AR的小分子抑制均无法抑制或挽救NK细胞的功能分别表明另一种间接机制可能发挥了ILC2sNK细胞抑制功能的作用。
　　 ILC2s可以促进常规和调节性CD4+在肺中T细胞的扩展。为了确定ILC2介导的NK细胞抑制是否依赖于伴随的CD4+T细胞功能，出国看病服务机构将消耗CD4的抗体与IL-33一起使用。然而，缺乏CD4+T细胞或中和IL-10或转化生长因子-β都不能挽救IL-33诱导的NK细胞抑制。同样，CD4+Treg细胞的耗竭没有损害IL-33对肺NK细胞抑制的作用。为了询问其他适应性免疫细胞是否也促成该表型，出国看病服务机构向WT，μMT和Rag2-小鼠施用了IL-33，然后测量了肺NK细胞产生的IFN-γ。出国看病服务机构发现，WT，μMT和Rag2-//小鼠的肺NK细胞同样受到IL-33治疗的损害，表明ILC2与非自适应免疫细胞协同抑制NK细胞功能。此外，与IL-33治疗的WT小鼠相比，Rag2-小鼠的IL-33引发，随后的B16-F10或LL/2过继转移导致了转移负担的相似增加。B16-F10过继转移到既缺乏适应性淋巴细胞又缺乏先天性淋巴细胞的小鼠中，证实了NK细胞在预防肺转移性播种中的重要作用，并且在缺乏ILC的情况下没有表现出IL-33致敏的累加作用。最后，出国看病服务机构创建ILC2缺陷型小鼠上的Rag2-/-背景，它也未能抑制NK细胞响应IL-33。因此，活化的ILC2s可以通过先天的免疫调节机制抑制NK细胞。
　　 ILC2衍生的IL-5促进嗜酸性粒细胞介导的肺NK细胞抑制
　　 髓样细胞参与促进肺转移形成，可以抑制NK细胞并被ILC2诱导或刺激，从而提出了髓样-ILC2相互作用阐明了IL-33驱动的NK细胞抑制的假说。出国看病服务机构在第3天首次对PBS和IL-33处理的小鼠的肺中的髓样区进行了表征，这显示了预期的嗜酸性粒细胞，单核细胞衍生的炎性巨噬细胞和树突状细胞以及嗜中性粒细胞和单核细胞的涌入。给定的Gr-1的已知免疫抑制功能+骨髓细胞，出国看病服务机构使用抗体介导的耗竭来评估其在IL-33驱动的NK细胞抑制中的作用。抗Gr-1处理逆转了IL-33对NK细胞抑制IFN-γ和GzmB产生的作用。然而，对髓样区室的平行评估显示，在包括嗜酸性粒细胞在内的IL-33致敏小鼠中，多种免疫细胞受到抗Gr-1处理的影响，突出了该试剂的广泛直接或间接作用。Ly-6G+中性粒细胞的靶向耗竭或CCR2-CCL2介导的单核细胞流入的损伤在恢复IL-33驱动的NK细胞抑制中主要是失败的。同样，氯膦酸盐-脂质体介导的肺泡巨噬细胞耗竭未能挽救NK细胞抑制作用。这表明，中性粒细胞，尽管在其它模型中其前转移函数是不参与肺NK细胞的IL-33介导的抑制。
　　 出国看病服务机构发现肺嗜酸性粒细胞增多与NK细胞抑制IFN-γ产生最密切相关。尽管嗜酸性粒细胞表面Ly-6G阴性，但嗜酸性粒细胞表达Ly-6C，在抗Gr-1治疗的IL-33致敏肺中，嗜酸性粒细胞数量减少。为了具体评估嗜酸性粒细胞在NK细胞抑制中的作用，出国看病服务机构中和了IL-5，IL-5主要由先天性2型肺部炎症期间ILC2分泌。在IL-33致敏的小鼠中，抗IL-5处理可显着降低肺嗜酸性粒细胞的数量，而中性粒细胞的数量则不受影响。而且，抗IL-5治疗也没有损害IL-33的其他炎性作用，例如通过RELMα表达评估的肺泡巨噬细胞和单核细胞衍生的炎性巨噬细胞的替代活化。在同时用PI和抗NK1.1刺激后，抗IL-5处理可抵抗IL-33对肺NK细胞产生的IFN-γ和GzmB的抑制作用。
　　 鼻内施用重组IL-4，IL-13，IL-5或粒细胞巨噬细胞集落刺激因子不会诱导肺嗜酸性粒细胞增多或NK细胞抑制，这表明IL-5对于抑制NK细胞至关重要但不足以。实际上，IL-5与其他炎性介质协同作用可促进肺嗜酸性粒细胞增多。相关地，Il5--小鼠发生较少的肺转移，出国看病服务机构发现在B16-F10转移后，经PBS或Asp处理的Il33-小鼠的生存期延长。此外，嗜酸性粒细胞过继转移至幼稚小鼠或将NK细胞与IL-33治疗的小鼠的离体来源或纯化的肺嗜酸性粒细胞共培养可有效抑制肺NK细胞功能，而2型常规树突状细胞是单核细胞衍生的炎性巨噬细胞和肺泡巨噬细胞没有。值得注意的是，幼稚和发炎的肺嗜酸性粒细胞均不表达ST2，并且未观察到IL-33对NK细胞-嗜酸性粒细胞共培养的累加作用。这些数据表明，ILC2衍生的IL-5对于嗜酸性粒细胞介导的NK细胞功能抑制具有重要作用。
　　 IL-33诱导的肺NK细胞效应分子的抑制不受转录调控
　　 为了研究基因表达方面如何影响肺NK细胞，出国看病服务机构对流式细胞仪纯化的经PBS或IL-33处理的肺NK细胞进行了单细胞RNA测序和大量RNA-seq分析WT小鼠在不同时间点。在第3天，出国看病服务机构在scRNA-seq数据中鉴定了PBS和IL-33处理的肺中NK细胞的7个簇，并用其基因表达模式进行了注释，并评估了其成熟和增殖标记。簇7表现出表明CD27hiCD11b低未成熟NK细胞的特征，其相对丰度与出国看病服务机构的流式细胞仪观察结果相对应。治疗组的比较没有显示出新簇的出现，但是提示了在IL-33治疗中簇的相对比例的变化和簇之间基因表达的细微整体变化。与蛋白质表达测量相反，效应分子基因如Ifng和Gzmb分别不受IL-33处理或上调。
　　 出国看病服务机构还对IL-33给药后的肺NK细胞进行了批量RNA-seq时程分析，以捕获基因转录随时间的变化。出国看病服务机构测试了IL-33处理是否导致NK细胞共有蛋白，效应分子或激活和抑制受体基因组表达的变化。在高功率大剂量RNA-seq实验中，在鼻内注射IL-33后第2、7或14d或第3天，出国看病服务机构没有观察到表达的显着调节。总而言之，这些转录组学研究表明，转录后调控可能影响IL-33给药后肺NK细胞的功能损伤。
　　 活化的ILC2s通过嗜酸性粒细胞介导的代谢机制抑制NK细胞
　　 由于NK细胞功能的转录后调控可以通过它们的代谢状态来控制，因此出国看病服务机构推测，肺NK细胞功能的整体抑制受到嗜酸性粒细胞诱导的NK细胞代谢变化的影响。NK细胞感测到了代谢应激，从而导致哺乳动物雷帕霉素复合物1活性的靶标受到抑制，核糖体亚基S6的磷酸化降低。出国看病服务机构观察到经刺激，经IL-33或Asp处理的肺NK细胞中的磷酸S6水平降低。在经Asp处理的ILC2缺陷型小鼠中，磷酸化S6水平未发生变化，而在经IL-33处理的WT小鼠中经IL-5中和后，其磷酸化水平得以恢复。此外，通过核磁共振对肺培养物进行代谢谱分析显示，IL-33治疗后葡萄糖使用量增加。活化的嗜酸性粒细胞主要利用糖酵解并表达相关的代谢途径基因，包括葡萄糖转运蛋白Glut1和Glut3。相应地，出国看病服务机构观察到肺嗜酸性粒细胞摄取2-NBDG葡萄糖类似物，其在用IL-33治疗的小鼠中增加。重要的是，在C57BL/6J和BALB/c小鼠中，IL-5-中和作用逆转了IL-33介导的葡萄糖使用和乳酸产生的变化。此外，对注入[U-13C]葡萄糖的小鼠进行了质谱成像，以评估发炎的肺部的体内糖酵解作用。出国看病服务机构观察到在野生型但非ILC2缺陷型小鼠的IL-33治疗中[U-13C]和[U-12C]乳酸/葡萄糖比率增加。这些数据支持以下假设：ILC2诱导的嗜酸性粒细胞调节肺环境中葡萄糖的使用。
　　 出国看病服务机构进一步测试了葡萄糖耗竭或乳酸浓度升高是否与NK细胞功能受损有关。出国看病服务机构发现，葡萄糖限制会损害幼稚的肺NK细胞功能，而高糖培养基可通过IL-33处理的肺NK细胞在激活时挽救IFN-γ和GzmB的产生以及磷酸S6的表达。此外，在给予葡萄糖后，来自经IL-33处理的小鼠肺的离体活化的NK细胞表现出增加的细胞外酸化率。与PBSCtrls相比，基因组富集分析在经IL-33处理的肺NK细胞中鉴定了与糖酵解相关的基因的富集。有趣的是，在乳酸中培养幼稚肺NK细胞可抑制IFN-γ，但不能抑制GzmB的产生。这些数据表明，ILC2诱导的嗜酸性粒细胞增多可通过抑制NK细胞的葡萄糖代谢来协调抑制NK细胞的功能。
　　 ILC2-嗜酸性粒细胞轴的治疗靶向可恢复NK细胞介导的肿瘤控制
　　 由于出国看病服务机构观察到IL-33驱动的ILC2s激活代表1型免疫调节机制中的中心节点，因此出国看病服务机构推测该轴可能代表了潜在的治疗靶点。鉴于靶向IL-5-5和IL-33的治疗剂已分别在临床或正在进行2期临床试验[32]，出国看病服务机构首先使用IL-33捕集阱来阻断Asp变应原诱导的气道炎。预防性给药可预防在Asp给药后WT小鼠中NK细胞的抑制，同时还可减少2型炎症的标志物。类似地，在IL-33中和后，Asp诱导的B16-F10黑色素瘤转移负担减轻了。除恢复IL-5的抗NK-5细胞功能外，出国看病服务机构发现预防性给药可显着降低Asp-和IL-33致敏小鼠转移B16-F10细胞时的转移负担。出国看病服务机构进一步对携带4T1或4T1-T原位植入的乳腺癌细胞的BALB/c小鼠施用抗IL-5，发现在经Asp处理的组中肺转移形成减少，但对原发肿瘤负担无影响。此外，鉴于BALB/c小鼠易患先天性和适应性2型炎症，出国看病服务机构调查了预防性用药是否可以减少幼稚小鼠的转移形成；出国看病服务机构观察到，在原发性乳腺癌转移模型中，IL-5和IL-33的中和作用均降低了肺转移。因此，靶向ILC2-嗜酸性粒细胞轴可以恢复肺NK细胞的抗转移功能。
　　 总之，出国看病服务机构的数据暗示了ILC2驱动的先天性2型炎症在促进气道转移性播种中的作用。出国看病服务机构发现ILC2s可以通过嗜酸性粒细胞介导的代谢检查点来局部拮抗肺NK细胞功能。此途径的治疗或遗传干扰可恢复NK细胞功能，并减轻肿瘤负担。
　　 促进炎症原发肿瘤来源的和外源因子可以在转移前利基影响CTC逮捕。出国看病服务机构发现，ILC2驱动的炎症对CTC的机械捕获没有影响，但是会严重抑制肺NK细胞的功能。与出国看病服务机构的预期相反，适应性免疫细胞并未发挥主要作用，而靶向嗜酸性粒细胞可有效逆转IL-33对NK细胞的作用。尽管嗜中性粒细胞也被称为增强CTC外渗和肺转移形成，出国看病服务机构发现特异性消融在阻断IL-33介导的NK细胞抑制方面无效。相反，抗IL-5单克隆抗体治疗可特异性靶向嗜酸性粒细胞，并减少NK细胞抑制和肺转移性播种。尽管如此，嗜酸性粒细胞也有报道在肺中具有抗转移功能。然而，出国看病服务机构的研究使用的IL-33减少了10到20倍，或者与Il33-小鼠一起使用了生理刺激，以揭示在具有不同遗传背景和不同动物设施的六个不同肿瘤模型中的前转移作用。虽然嗜酸性粒细胞主要与2型炎性疾病相关，但对其抑制1型免疫的能力知之甚少。
　　 1型细胞因子可以直接拮抗适应性和先天类型的效应子功能2淋巴细胞。倒数2型细胞因子驱动的调节机制不太明确，虽然IL-4可以在T细胞活化的早期阶段抑制IFN-γ产生。此外，TREG细胞和最近鉴定的ILCREG细胞已知通过产生IL-10或TGF-β的抑制1型免疫细胞;但是，出国看病服务机构发现这些细胞因子或适应性免疫在ILC2介导的NK细胞抑制中没有发挥重要作用。虽然ILC2–嗜酸性粒细胞驱动的先天免疫检查点抑制NK细胞的抗转移功能，但其对适应性抗肿瘤免疫的作用尚不清楚。B16-F10和其他癌细胞系易受单一免疫治疗和联合免疫治疗的影响，促使未来的研究来评估ILC2驱动的抑制作用对适应性抗肿瘤免疫的作用。
　　 IL-33主要促进先天性和适应性2型免疫，虽然有IL-33的报告直接刺激NK和CD8+T细胞。但是，出国看病服务机构在缺乏ILC2或抗IL-5治疗的小鼠中的结果显示，IL-33间接抑制了先天1型免疫。然而，强制过表达IL33由肿瘤，或长时间的给药高剂量的IL-33，可促进通过涉及在原发肿瘤环境ILC2s间接机制的抗肿瘤免疫。出国看病服务机构的数据揭示了ILC2s和IL-33在转移前的生态位中的关键作用，这可能会刺激进一步的研究，使在原发性肿瘤和周围部位的IL-33的生理和治疗诱导作用脱离。此外，由于出国看病服务机构的IL-33中和实验和Il33-小鼠实验针对的是IL-33的内源性释放，因此出国看病服务机构推测ILC2介导的先天1型免疫抑制可能影响其他生理作用，例如脂质代谢和伤口愈合。实际上，IL-33也可以抑制脂肪组织NK细胞。
　　 IL-5主要因其在嗜酸性粒细胞发育和功能中的重要性而闻名。出国看病服务机构的中和实验揭示了IL-5在介导ILC2依赖性NK细胞抑制中的重要作用。重要的是，IL-5单独不足以发挥该功能和可能的作品与促进嗜酸性炎症，例如IL-13和其他eotaxinsIL-33诱导的因子音乐会。通过中和内源性产生的IL-5，出国看病服务机构靶向了一种生理途径，以补充使用ILC2缺陷型小鼠的实验，该小鼠缺乏气道中IL-5的主要先天来源。同样，这些方法将嗜酸性粒细胞识别为与ILC2协同抑制NK细胞功能的关键骨髓细胞类型。它仍有待确定是否ILC2s，或IL-5的其它来源如T2或肥大细胞，用NK细胞在其它器官中达到相同的控制。
　　 出乎意料的是，出国看病服务机构发现抑制IL-33给药后，肺NK细胞效应子功能的抑制与核心NK细胞基因转录的重大变化或肺NK细胞簇的移动并不吻合。但是，NK细胞功能的转录后调节可以由激活诱导的代谢需求和细胞外代谢物浓度来控制。尽管在静止时功能和代谢处于静止状态，但离体激活导致来自IL-33处理的肺的NK细胞糖酵解增加。与此相符的是，幼稚的NK细胞最初更依赖于氧化磷酸化来实现效应子功能，从而增加了炎症环境提供信号增加对糖酵解的依赖性的可能性。在经IL-33治疗的肺环境中，对肺NK细胞糖酵解的依赖性增加与代谢物生物利用度的改变相吻合。葡萄糖和乳酸酸中毒IMPAIR效应NK的功能和其它淋巴样细胞的低浓度的。在IL-33感染的环境中，肺嗜酸性粒细胞可能是局部葡萄糖消耗和乳酸产生的原因。嗜酸性粒细胞是发炎的肺中最普遍的髓样人群，容易摄取2-NBDG，而发炎的肺的离体培养比未发炎的肺使用葡萄糖和分泌更多的乳酸，这通过抗IL-5介导的嗜酸性粒细胞的预防而被逆转。出国看病服务机构观察到的磷酸化S6减少和效应分子下游翻译证实了葡萄糖耗竭或乳酸酸中毒对幼稚肺NK细胞功能的影响。这反映了发炎的肺中NK细胞的表型，而磷酸化S6和效应分子的产生可通过嗜酸粒细胞增多症的遗传或治疗性阻断而得以挽救。同样，在高葡萄糖条件下培养可部分抑制被抑制的肺NK细胞。最后，使用[U-13C]葡萄糖注入的小鼠，出国看病服务机构证明了IL-33在发炎的肺部环境中增加了葡萄糖通量。这些发现支持了免疫微环境中营养竞争的概念。尽管在CD8+T细胞中AMPKα1可以感知葡萄糖的利用来调节哺乳动物雷帕霉素复合物1和S6K的靶标，但尚不清楚什么NK细胞内在机制负责感知代谢物的利用。因此，出国看病服务机构提供了令人信服的证据，即ILC2驱动的肺嗜酸性粒细胞调节了代谢产物的细胞外可用性，从而损害了肺NK细胞的有效糖酵解依赖性效应子功能。