肝细胞癌（HCC）是世界第五大最常见的癌症，仍然癌症死亡的第三个最常见的原因，有近321200人死亡，366100新发病例在中国报告。HCC发展的危险因素包括由乙型肝炎病毒（HBV）或丙型肝炎病毒（HCV）引起的病毒感染引起的肝硬化，过量饮酒，威尔森氏病，IV期原发性胆汁性肝硬化和环境暴露。黄曲霉毒素。虽然婴儿接种HBV感染的一级预防已被证明对中国儿童有效，但在实施HBV疫苗接种计划15年后，年轻人群（0-19岁）的肝癌晚期死亡率降低了95％在1986年的中国高风险地区，所有年龄组的发病率趋势可能为时过早。
　　尽管现代化管理，包括引入改进的手术技术,综合治疗和靶向治疗，但HCC患者的总体存活率（OS）没有显着改善。此外，HCC相对化疗耐药，包括部分肝切除和肝移植在内的外科手术干预仍然是HCC的唯一现实治疗选择。然而，由于检测的局限性和对医疗保健系统缺乏认识，不到40％的HCC患者由于诊断时疾病的晚期阶段和肝硬化或纤维化肝脏中多发病灶的发生而有资格接受手术。通过基于血清甲胎蛋白（AFP）和肝脏超声的早期筛选方法已经进行了各种努力来提高肝癌晚期存活率，这是最广泛使用的HCC筛查方法;然而，AFP的灵敏度为25％至65％，超声波的灵敏度为60％，通过这些方法检测具有如此高影响的疾病仍然不是最理想的。因此，必须改进诊断方法以在早期检测HCC，以便可以在患有HCC和转移性结肠直肠癌的患者中进行有效治疗。虽然血清AFP长期以来被用作HCC筛查和监测的标志物，但它不是HCC的敏感或特异性诊断标志物。此外，AFP水平可以在非HCC疾病中升高，包括慢性肝病，如肝硬化和肝脏炎症，肝癌晚期;肝内胆管细胞癌;和转移性结肠癌。尽管血清AFP水平可有效预测疾病预后并监测产生AFP的HCC患者的肿瘤进展，但最新的美国肝病研究协会（AASLD）指南不再建议将AFP检测作为诊断评估的一部分。在这些指南中，建议对肝结节直径，计算机断层扫描（CT），磁共振成像（MRI）或组织活检进行评估，以诊断HCC。
　　目前,肿瘤分子驱动因子和肿瘤活检样本中特定DNA突变的检测已经成为个体化医学时代的常规临床实践，其目的是评估特定生物标志物以预测对靶向药物的反应或抗性。然而，由于肿瘤异质性，在同一原发肿瘤和转移瘤的解剖学上不同区域的“空间和时间”中的不同基因组谱描述，单个活检可能不足以表征肿瘤的遗传异质性。此外，在疾病过程中，对靶向药物的获得性耐药性是常见的。这些发现表明迫切需要鉴定其他癌症特异性生物标志物，用于早期诊断，肿瘤进展监测和预后预测。与组织活检不同，液体活组织检查（包括循环肿瘤细胞（CTC）和循环肿瘤DNA（ctDNA））基于在疾病过程中的多个时间点以方便且微创的方式获得样品。液体活检能够实现癌症的无创检测和表征，治疗反应的预测，疾病复发的监测以及对靶向治疗的抗性机制的鉴定。在本文中，我们将重点关注临床应用，近期研究和液体活检的未来前景，尤其关注HCC。
　　1869年，澳大利亚医生托马斯阿什沃思（ThomasR.Ashworth）首次在乳腺癌患者的血液中发现了CTC。CTC是肿瘤细胞，从原发性实体肿瘤转移到外周循环或淋巴系统进行循环，最终在血液，骨髓，淋巴结或其他健康器官中生长。该过程发生在肿瘤发展的每个阶段。换句话说,CTC是早期诊断和疾病复发监测的有用标志物。然而，CTC的研究已经受到数十年的阻碍，因为这些细胞在患者血液中以极低的频率存在。在转移过程中，这些细胞必须努力在血液中存活，并且少于0.01％的CTC被引入循环中以存活转移。因此，CTC检测已成为瓶颈，并且改进检测过程已证明是困难的。
　　 基于生物特性的技术依赖于抗原-抗体结合和与CTC表面标志物结合的特异性抗体，包括上皮细胞粘附分子（EpCAM），人表皮生长因子受体（Her2），细胞角蛋白（CK）家族成员（CK8），CK18以及CK19）和间充质标记物（N-钙粘蛋白和波形蛋白）。免疫捕获方法的原理是靶向特定抗原;这是通过与相应抗体缀合的磁珠实现的，然后将其用于结合靶细胞以在某个方向上的磁场作用下产生“靶细胞-抗原-抗体-磁珠”复合物以富集靶细胞。有两种免疫捕获方法：阳性富集和阴性富集。阳性富集使用与抗靶细胞抗体结合的磁珠的组合，以在磁场的影响下直接分离肿瘤细胞。最具代表性的正浓缩方法是Cell-Search系统（CSS：VeridexLLC，NJ，USA），这是世界上第一个也是唯一一个被美国食品药品管理局（FDA）和中国国家食品药品监督管理局（CFDA）批准用于检测CTC诊断恶性疾病的产品。在该平台中，在初始步骤中使用抗EpCAM抗体包被的铁磁珠来富集CTC，之后使用CK，CD45和DAPI染色来确认CTC的存在并去除白细胞。在CTC技术的早期市场中，该系统被认为具有良好的重复性，灵敏度和特异性（它仅需要7.5ml血液，用于检测许多血细胞和WBC中的CTC）。然而，在上皮-间质转化（EMT）期间，它不能捕获可能已经丢失这些特定分子的CTC，例如EpCAM。此外，肿瘤细胞表面分子（如EpCAM）在许多实体上皮肿瘤中的表达是非常不均匀的甚至是不可检测的（例如在黑素瘤的情况下），这导致不足和局限，甚至限制临床应用。EpCAM依赖策略直接捕获CTC。此外，在细胞表面抗原的抗体交联之后，抗-EpCAM抗体捕获的CTC不再作为未刺激的幼稚细胞保留，并且这导致分离的CTC的细胞内不稳定性，使得它们不适合于随后的蛋白质，分子和基因组分析。这些限制导致了负浓缩方法的发展。Cytelligen系统被认为是减法富集（SE）和免疫染色-荧光原位杂交（iFISH）的独特综合平台，用于有效检测稀有循环细胞，包括从各种固体上皮肿瘤，循环内皮细胞（CECs）脱落的CTC）和干细胞代表了这种方法。各种CTC检测方法各有优缺点。因此，长期以来，正在开发分离和富集CTC的方法。