肝激酶B1是一种普遍表达的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，最初被发现为家族性Peutz-Jeghers综合征（PJS）的突变，其特征是形成有恶性息肉在胃肠道和嘴唇，口腔粘膜，生殖器或手掌表面的色素沉着过多的斑点和发生癌症的可能性增加，尤其是肺癌，卵巢癌，乳腺癌，结肠癌和胰腺癌。LKB1是AMP活化的蛋白激酶的上游激活（AMPK），一个主要的细胞能量传感器，以及所涉及在多种如细胞极性，迁移和基因转录（处理AMPK相关激酶（方舟））。
　　 虽然被认为在多种组织的抑癌，在肝，LKB1先前已经在肝再生和HCC增殖（牵连）。在肝再生期间，HGF激活LKB1-AMPK轴，导致内皮一氧化氮合酶（eNOS）的非规范激活，并伴随第二信使一氧化氮的增加，促进HGF诱导的肝细胞增殖）。此外，小鼠肝癌细胞（SAMe-D细胞）具有增加的LKB1的磷酸化以及增加的细胞质p53水平，使得这些细胞对UVC暴露诱导的细胞凋亡更具抗性。同样地，另一种类型的小鼠肝细胞瘤细胞（更可以细胞）由于抑制剂基因。最后，LKB1表达在来自酒精和NASH的HCC患者的肝脏中增加，因为预后不良的患者具有更高的LKB1表达。进一步探讨了LCC1在HCC中过表达的机制。在此基础上，LKB1和NEDD8的水平在HCC患者中呈正相关。此外，当用neddylation抑制剂Pevonedistat治疗荷瘤小鼠时，LKB1水平下降。同样，当使用Pevonedistat处理肿瘤前肝细胞或使用分子方法沉默NEDD8时，LKB1水平也降低）。Pevonedistat诱导的肝肿瘤细胞凋亡通过过表达LKB1而降低，因为这能够克服由抑制剂引起的稳定性丧失。另外，在His标记的NEDD8纯化后检测到LKB1，强烈暗示LKB1直接被neddy化并且NEDD8直接稳定HCC中的LKB1。
　　 PI3K/Akt/mTOR信号通路是细胞存活和增殖的关键调节因子，也是肝癌发生的主要途径之一。它经常在HCC中失调，其活化与晚期和不良预后HCC相关。Akt，也称为蛋白激酶B（PKB），是一种丝氨酸/苏氨酸激酶，是PI3K的关键下游效应物，可调节参与包括代谢，细胞生长，细胞凋亡和血管生成在内的多种蛋白质的功能。Akt可能是人类癌症中最常被激活的癌蛋白（并且已知通过促进增殖，细胞存活，肿瘤生长和转移在HCC的发展和进展中发挥关键作用。此外，Akt也被描述为“Warburg激酶”，因为它对转化为有氧糖酵解和代谢重编程的酶有影响，这是众所周知的癌症标志。在此基础上，已发现Akt促进糖酵解和氧化磷酸化。尽管在恶性转化中具有关键作用并且是有希望的抗癌靶标，但是Akt失调的机制尚未完全阐明。先前已经表明，Akt经历翻译后调节事件，例如遍在蛋白化和SUMOylation。2015年，研究小组最终描述了HCC中Akt过度表达的机制。研究人员已经证明全球neddylation在人类HCC中高度增加，与较差的预后和Akt蛋白水平相关。如在人类HCC中所观察到的并且支持neddylation和Akt在肝癌晚期发生中的作用，还发现neddylation和Akt蛋白水平在来自HCC小鼠模型的肝脏和肝细胞中上调。使用不同的体外方法显示，Akt是NEDD8的靶标，并且该PTM促进肝脏中的Akt过表达。通过用表达组氨酸标记的NEDD8的质粒转染的原代肝细胞中的组氨酸-NEDD8缀合蛋白的下拉来检测Akt。此外，发现用特异性药理学抑制剂Pevonedistat或针对NEDD8或deneddylaseNEDP1的特异性siRNA抑制neddylation导致Akt蛋白水平的下调。最后，环己酰亚胺测定证实neddylation稳定Akt，因为NEDD8沉默显着降低其半衰期。在代谢方面，观察到Akt部分介导了neddylation抑制诱导的代谢变化，导致肝癌细胞和肿瘤前肝细胞的ATP消耗，氧化应激和最终细胞凋亡，支持激酶在肝癌晚期存活和进展中的主要作用。在这方面，Akt过表达，其增强氧化磷酸化和糖酵解，抵消了由Pevonedistat治疗诱导的代谢转换和相关的细胞死亡。这些结果得到了验证在体内使用两种不同的HCC小鼠模型，即Prohibitin（Phb1）缺陷小鼠和HepG2肿瘤异种移植物，其中使用Pevonedistat和NEDD8siRNA抑制neddylation分别促进细胞死亡，肿瘤消退和代谢重编程，以及全球neddylation和Akt下调。这些研究结果表明，Aktneddylation对肝癌细胞的恶性转化至关重要，并揭示Akt的neddylation是一种新的调节机制，可以解释Akt的稳定性。为缺氧微环境通过许多机制促进癌症进展，包括激活血管生成，细胞存活，恶性细胞的运动性和侵袭性，以及增加的EMT能力。在这种情况下，HIF-2α，氧稳态的主要调节因子，被认为有利于癌细胞的增殖。在HCC中，据报道HIF-2α表达与患者预后不良相关。有趣的是，先前已显示HIF-2α表达通过NEDD8缀合以活性氧（ROS）依赖性方式稳定。在HCC中，研究人员的初步研究结果。已经表明SerpinB3，通常是由缺氧诱导的，可以通过促进HIF-2α（的直接和选择性neddylation和稳定影响肝癌细胞的行为）。
　　 在这里，研究人员回顾了关于NEDD8介导的PTM在HCC发病机制，预后和逆转中的相关性的最新发现。在这方面，研究小组和其他人最近的报告清楚地表明，首先在HCC中增强了neddylation活性，其次，使用neddylation抑制剂Pevonedistat治疗在临床前小鼠模型中减少了肝癌细胞生长和肿瘤消退。在这些情况下，Pevonedistat可以通过触发细胞周期停滞，衰老和细胞凋亡来抑制癌细胞的生长以及细胞能量代谢的失调，从而起到抗肿瘤药物的作用。Pevonedistat目前已进入几项临床试验，以治疗白血病和晚期实体肿瘤。针对Pevonedistat与其他全身性药物联合应用的临床试验，如多激酶抑制剂索拉非尼，目前唯一批准用于晚期HCC治疗的全身性药物，或临床批准的自噬抑制剂，如抗疟疾氯喹及其衍生物羟氯喹，为了克服Pevonedistat诱导的促存活自噬反应和相关的对Pevonedistat的耐药性，可以提供一种潜在的新型治疗策略来应对晚期HCC。此外，研究人员提供了与HCC相关的主要NEDD8靶标的全面修订，例如CRL，HuR，LKB1，Akt和HIF-2α。目前，关于HCC中的一些neddylation目标仍有许多未解决的问题，即，涉及新型上述NEDD8底物蛋白的neddylation和deneddylation途径的酶以及与neddylation相关的残基。最后，在不久的将来，研究人员认为非常敏感的蛋白质组学方法的应用可能导致鉴定涉及HCC发病机制的新型neddylation靶标，扩大NEDD8靶标的范围，并增加研究人员目前对NEDD8介导的修饰的真正重要性的认识。